正在加载图片...
细胞的存活,同时使生长代谢减慢。 添加生长调节剂保存采用生长延缓剂或抑制剂延缓或抑制细胞生长。常用的延缓剂有 矮壮素(CCC)、丁酰肼(B9)、多效唑(PP33),生长抑制剂有脱落酸(ABA)等。 低压保存即在比较低的压力下保存植物组织。低压保存的原理尚不清楚。 上述离体保存方法虽然行之有效,并且使用了多年,但是这些保存方法必须作定期的继 代培养和重复转移,这不仅增加了工作量,而且植物细胞在多次继代培养后会产生遗传变异。 因此,近年来人们在使用传统离体保存方法的同时,进行了大量的培养物超低温保存研究工 作。 超低温保存是指在-80℃以下的超低温保存种质资源的技术。超低温常用干冰 (-79℃)、深冷冰箱(-196℃)及液氮蒸汽相(-140℃)获得。由于冷源通常选用液氮,因 此超低温保存又称液氮保存。在超低温条件下保存材料,可以大大减慢,甚至终止代谢和衰 老过程,保持生物材料的稳定性,最大限度地抑制生理代谢强度,降低劣变发生频率,达到 长期保存种质的目的(王郁民,1991)。 超低温保存程序比较复杂,主要包括:准备合适的植物材料,培养物冷冻前的预处理, 选择合适冰冻保护剂,冰冻,贮存,解冻,解冻后的处理以及生活力测定和重新培养。 研究证明:许多植物的种子、花粉、分生组织、芽、愈伤组织和细胞等都能成功地保存 在液态氮温度(-196℃)下而生活力不受影响(胡晋等,1996)。在液态氮中贮藏过的细胞、 茎尖生长点及胚等均能再生植株(Bajaj,1983)。 超低温保存对于那些寿命短的植物,组织培养体细胞无性系,遗传工程的基因无性系, 抗病毒的植物材料以及濒临灭绝的野生植物,都是很好的保存方法。目前超低温保存存在涉 及的试验材料面窄,长期连续使用冻存材料的再生能力衰退,组织培养后代遗传稳定性仍未 解决等问题。园艺植物超低温保存成功的种类已有苹果、酸樱桃、棕枣、蔷薇、草莓、胡萝 卜、豌豆等(陈振光,1995)。 (4)基因文库保存随着分子生物学理论和实验技术的发展,许多植物种类利用基因 组DNA克隆技术成功地构建了本系统的基因文库,而且不断地补充和扩建这一文库,从而 为保存和繁殖种质资源提供了又一种有效的方法。 基因文库的构建过程是用人工的方法,从植物中提取大分子量的DNA,用限制性内切 酶将其切成许多DNA片段。然后再通过载体把该DNA片段转移到繁殖速度快的大肠杆菌 中去,通过大肠杆菌的无性繁殖,产生大量的、生物体中的单拷贝基因。这样当需要某个基 因时,就可通过某种方法在此文库中去“钩取”获得。因此,建立某一物种的基因文库,不 仅可以长期保存该物种的遗传资源,而且还可以通过反复的培养繁殖、筛选,来获得各种基 因。 种质资源的保存,除资源材料本身的保存外,还应包括种质资源的各种资料。每一份种 质资源材料应有一份档案。档案中记录有编号、名称、来源、研究鉴定年度和结果。档案按 材料的永久编号顺序排列存放,并随时将有关各该材料的试验结果及文献资料登记在档案 中。根据档案记录可以整理出系统的资料报告。档案资料输入电子计算机贮存,建立数据库, 以便于资料检索和进行有关的分类、遗传研究。 1.5种质资源的评价与利用 1010 细胞的存活,同时使生长代谢减慢。 添加生长调节剂保存 采用生长延缓剂或抑制剂延缓或抑制细胞生长。常用的延缓剂有 矮壮素(CCC)、丁酰肼(B9)、多效唑(PP333),生长抑制剂有脱落酸(ABA)等。 低压保存 即在比较低的压力下保存植物组织。低压保存的原理尚不清楚。 上述离体保存方法虽然行之有效,并且使用了多年,但是这些保存方法必须作定期的继 代培养和重复转移,这不仅增加了工作量,而且植物细胞在多次继代培养后会产生遗传变异。 因此,近年来人们在使用传统离体保存方法的同时,进行了大量的培养物超低温保存研究工 作。 超低温保存 是指在-80℃以下的超低温保存种质资源的技术。超低温常用干冰 (-79℃)、深冷冰箱(-196℃)及液氮蒸汽相(-140℃)获得。由于冷源通常选用液氮,因 此超低温保存又称液氮保存。在超低温条件下保存材料,可以大大减慢,甚至终止代谢和衰 老过程,保持生物材料的稳定性,最大限度地抑制生理代谢强度,降低劣变发生频率,达到 长期保存种质的目的(王郁民,1991)。 超低温保存程序比较复杂,主要包括:准备合适的植物材料,培养物冷冻前的预处理, 选择合适冰冻保护剂,冰冻,贮存,解冻,解冻后的处理以及生活力测定和重新培养。 研究证明:许多植物的种子、花粉、分生组织、芽、愈伤组织和细胞等都能成功地保存 在液态氮温度(-196℃)下而生活力不受影响(胡晋等,1996)。在液态氮中贮藏过的细胞、 茎尖生长点及胚等均能再生植株(Bajaj,1983)。 超低温保存对于那些寿命短的植物,组织培养体细胞无性系,遗传工程的基因无性系, 抗病毒的植物材料以及濒临灭绝的野生植物,都是很好的保存方法。目前超低温保存存在涉 及的试验材料面窄,长期连续使用冻存材料的再生能力衰退,组织培养后代遗传稳定性仍未 解决等问题。园艺植物超低温保存成功的种类已有苹果、酸樱桃、棕枣、蔷薇、草莓、胡萝 卜、豌豆等(陈振光,1995)。 (4)基因文库保存 随着分子生物学理论和实验技术的发展,许多植物种类利用基因 组 DNA 克隆技术成功地构建了本系统的基因文库,而且不断地补充和扩建这一文库,从而 为保存和繁殖种质资源提供了又一种有效的方法。 基因文库的构建过程是用人工的方法,从植物中提取大分子量的 DNA,用限制性内切 酶将其切成许多 DNA 片段。然后再通过载体把该 DNA 片段转移到繁殖速度快的大肠杆菌 中去,通过大肠杆菌的无性繁殖,产生大量的、生物体中的单拷贝基因。这样当需要某个基 因时,就可通过某种方法在此文库中去“钩取”获得。因此,建立某一物种的基因文库,不 仅可以长期保存该物种的遗传资源,而且还可以通过反复的培养繁殖、筛选,来获得各种基 因。 种质资源的保存,除资源材料本身的保存外,还应包括种质资源的各种资料。每一份种 质资源材料应有一份档案。档案中记录有编号、名称、来源、研究鉴定年度和结果。档案按 材料的永久编号顺序排列存放,并随时将有关各该材料的试验结果及文献资料登记在档案 中。根据档案记录可以整理出系统的资料报告。档案资料输入电子计算机贮存,建立数据库, 以便于资料检索和进行有关的分类、遗传研究。 1.5 种质资源的评价与利用
<<向上翻页向下翻页>>
©2008-现在 cucdc.com 高等教育资讯网 版权所有