盖上塞子，摇匀。放置2min后在595nm波长下比色测定（比色应在Ih内完成）。 以牛血清白蛋白含量（μg)为横坐标，以吸光度为纵坐标，绘出标准曲线。 2.样品中蛋白质含量的测定 (1)准确称取约200mg绿豆芽下胚轴，放入研钵中，加入5ml蒸馏水在冰浴中研成匀 浆，离心(4000r/min,10min),将上清液倒入10ml容量瓶，再向残渣中加入2ml蒸馏水， 悬浮后再离心l0min,合并上清液，定客至刻度。 (2)另取1支具塞试管，准确加入0lml样品提取液，再加入0.9ml蒸馏水，5ml考 马斯亮蓝G-250试剂，充分混合，放置2mn后，以标准曲线1号试管做参比，在595nm 波长下比色，记录吸光度。 五、结果处理 根据所测样品提取液的吸光度，在标准曲线上查得相应的蛋白质含量（μg),按下式 计算： 样品蛋白质含量（μg/g鲜重）=（查得的蛋白质含量（μg)×提取液总体积(ml) /(样品鲜重(g)×测定时取用提取液的体积(ml) 六、注意事项 比色应在出现蓝色2min~lh内完成。 七、思考题 1.考马斯亮蓝G一250法测定蛋白质含量的原理是什么？还有哪些蛋白质定量法？ 2.如何正确使用分光光度计？ 参考文献 鲁子贤。蛋白质化学。北京：科学出版社，1981 文树基。基础生物化学实验指导。西安：陕西科学技术出版社，1994 张龙翔.生物化学实验技术。北京：人民教育出版社，1981 盖上塞子，摇匀。放置 2min 后在 595 nm 波长下比色测定（比色应在 l h 内完成）。 以牛血清白蛋白含量（μg）为横坐标，以吸光度为纵坐标，绘出标准曲线。 2．样品中蛋白质含量的测定 （1）准确称取约 200mg 绿豆芽下胚轴，放入研钵中，加入 5ml 蒸馏水在冰浴中研成匀 浆，离心（4000r／min，10min），将上清液倒入 10ml 容量瓶，再向残渣中加入 2ml 蒸馏水， 悬浮后再离心 10min，合并上清液，定客至刻度。 （2）另取 1 支具塞试管，准确加入 0.l ml 样品提取液，再加入 0.9 ml 蒸馏水，5ml 考 马斯亮蓝 G－250 试剂，充分混合，放置 2min 后，以标准曲线 1 号试管做参比，在 595 nm 波长下比色，记录吸光度。 五、结果处理 根据所测样品提取液的吸光度，在标准曲线上查得相应的蛋白质含量（μg），按下式 计算： 样品蛋白质含量（μg／g 鲜重）＝（查得的蛋白质含量（μg）×提取液总体积（ml）） ／（样品鲜重（g）×测定时取用提取液的体积（ml）） 六、注意事项 比色应在出现蓝色 2 min～l h 内完成。 七、思考题 1．考马斯亮蓝G－250法测定蛋白质含量的原理是什么？还有哪些蛋白质定量法？ 2．如何正确使用分光光度计？ 参考文献 鲁子贤。蛋白质化学。北京：科学出版社，1981 文树基。基础生物化学实验指导。西安：陕西科学技术出版社，1994 张龙翔．生物化学实验技术。北京：人民教育出版社，1981