在一些特殊的能促进细胞贴附的物质如Ⅲ型胶原、血清扩展因子的帮助下,细胞 先吸附到底物上,随后与底物附着并伸展成一定的形状 不同细胞的贴附能力不同,如巨噬细胞、成纤维细胞等的贴附能力较强,能 在数min至数10min内贴附到固相表面;而神经元、羊水细胞等的贴附能力则 较弱,一般需要数h乃至更长的时间才能贴附到固相表面。 (二)接触抑制与密度依赖性 对于相当一部分体外培养的贴附细胞来说,随着细胞不断的生长与分裂, 相邻两个细胞彼此靠近时,其中之一或两个细胞便会停止移动而不至于重叠起 来,转而朝向未生长有细胞的空间生长,这种现象被称为接触抑制( contact inhibition)。而进一步的生长会使细胞密度变得越来越大直至形成一个细胞单层, 在此过程中,细胞与培养基接触的面积也会因此而减少,此时,细胞的分裂便会 停止,但细胞还会存活一段时间,这种现象被称为密度抑制( density inhibition) 或密度依赖性。通常,细胞的这种密度依赖性与培养基中血清的浓度关系密切 与体外培养的正常细胞不同,转化细胞或恶变的肿瘤细胞的接触抑制特性降 低或丧失,导致细胞重叠生长。同时,转化细胞或恶变的肿瘤细胞的密度依赖性 调节也常常降低,对血清的依赖性也降低,可以生长到一个较高的终末细胞密度。 四、体外培养细胞的生长过程 体外生长的培养细胞受营养条件、生长空间等因素的限制,当细胞增殖达到 定密度后,则需要分离出一部分细胞和更新营养液进行扩大培养,此过程称传 代( subculture)。每次传代以后,细胞的生长和增殖过程都会受一定的影响。 加之很多细胞特别是正常细胞,其在体外的生存也不是无限的过程,这就使得细 胞在体外培养时的生长过程与体内有着一系列不同的生存特点 (一)培养细胞的生命期 培养细胞生命期( life span of culture cells)是细胞在培养中持续增殖和生长 的时间。体内组织细胞的生存期与完整机体的死亡衰老基本一致。体外培养细胞 的生命期与细胞的种类、性状和原供体的年龄等情况密切相关。比如,来源自人 胚的二倍体成纤维细胞可在体外连续传代30~50代,约150~300个细胞增殖周 期,相当于一年左右的生存时间。相比之下,那些来自成体或衰老个体的细胞的 生存时间则较短,如体外培养的肝细胞或肾细胞一般仅能传几代或十几代在一些特殊的能促进细胞贴附的物质如Ⅲ型胶原、血清扩展因子的帮助下，细胞 先吸附到底物上，随后与底物附着并伸展成一定的形状。 不同细胞的贴附能力不同，如巨噬细胞、成纤维细胞等的贴附能力较强，能 在数 min 至数 10min 内贴附到固相表面；而神经元、羊水细胞等的贴附能力则 较弱，一般需要数 h 乃至更长的时间才能贴附到固相表面。 （二）接触抑制与密度依赖性 对于相当一部分体外培养的贴附细胞来说，随着细胞不断的生长与分裂，当 相邻两个细胞彼此靠近时，其中之一或两个细胞便会停止移动而不至于重叠起 来，转而朝向未生长有细胞的空间生长，这种现象被称为接触抑制（contact inhibition）。而进一步的生长会使细胞密度变得越来越大直至形成一个细胞单层， 在此过程中，细胞与培养基接触的面积也会因此而减少，此时，细胞的分裂便会 停止，但细胞还会存活一段时间，这种现象被称为密度抑制（density inhibition） 或密度依赖性。通常，细胞的这种密度依赖性与培养基中血清的浓度关系密切。 与体外培养的正常细胞不同，转化细胞或恶变的肿瘤细胞的接触抑制特性降 低或丧失，导致细胞重叠生长。同时，转化细胞或恶变的肿瘤细胞的密度依赖性 调节也常常降低，对血清的依赖性也降低，可以生长到一个较高的终末细胞密度。 四、体外培养细胞的生长过程 体外生长的培养细胞受营养条件、生长空间等因素的限制，当细胞增殖达到 一定密度后，则需要分离出一部分细胞和更新营养液进行扩大培养，此过程称传 代（subculture）。每次传代以后，细胞的生长和增殖过程都会受一定的影响。 加之很多细胞特别是正常细胞，其在体外的生存也不是无限的过程，这就使得细 胞在体外培养时的生长过程与体内有着一系列不同的生存特点。 （一）培养细胞的生命期 培养细胞生命期（life span of culture cells）是细胞在培养中持续增殖和生长 的时间。体内组织细胞的生存期与完整机体的死亡衰老基本一致。体外培养细胞 的生命期与细胞的种类、性状和原供体的年龄等情况密切相关。比如，来源自人 胚的二倍体成纤维细胞可在体外连续传代 30～50 代，约 150～300 个细胞增殖周 期，相当于一年左右的生存时间。相比之下，那些来自成体或衰老个体的细胞的 生存时间则较短，如体外培养的肝细胞或肾细胞一般仅能传几代或十几代