(1)涂片:用接种环挑取痰标本中的脓性或干酪样部分,直接涂于载玻 片上。痰膜大小为2.0cm×2.5cm (2)千燥:自然干燥 (3)微火固定 2.染色 (1)初染:滴加石炭酸复红染液,以盖满涂膜为宜。手持染色夹子,将 涂片置于酒精灯火焰上方,用弱火加热至出现蒸气,随时补充染液以防干涸, 持续5分钟。载玻片冷却后去掉染色夹,用细流水冲洗,甩干, (2)脱色:滴加3%盐酸酒精3-4滴于标本上,用手轻轻摇动载玻片, 直至涂片无红色染液脱下为止,用细流水冲洗,甩干。 (3)复染:滴加吕氏美兰染液2-3滴于标本上,染色0.5-1分钟,用细 流水冲洗,甩干。 3.将染色过的标本玻片置于两层滤纸中间,轻压滤纸、吸去玻片上水分 将标本玻片置于油镜下观察。 (三)厌氧培养法 1.肉渣培养基法 2.焦性没食子酸法 3.厌氧培养箱法:目前培养厌氧菌最好的方法（1）涂片：用接种环挑取痰标本中的脓性或干酪样部分，直接涂于载玻 片上。痰膜大小为 2.0cm×2.5cm。 （2）干燥：自然干燥 （3）微火固定 2. 染色 （1）初染：滴加石炭酸复红染液，以盖满涂膜为宜。手持染色夹子，将 涂片置于酒精灯火焰上方，用弱火加热至出现蒸气，随时补充染液以防干涸， 持续 5 分钟。载玻片冷却后去掉染色夹，用细流水冲洗，甩干。 （2）脱色：滴加 3%盐酸酒精 3-4 滴于标本上，用手轻轻摇动载玻片， 直至涂片无红色染液脱下为止，用细流水冲洗，甩干。 （3）复染：滴加吕氏美兰染液 2-3 滴于标本上，染色 0.5-1 分钟，用细 流水冲洗，甩干。 3. 将染色过的标本玻片置于两层滤纸中间，轻压滤纸、吸去玻片上水分。 将标本玻片置于油镜下观察。 （三）厌氧培养法 1. 肉渣培养基法 2. 焦性没食子酸法 3. 厌氧培养箱法：目前培养厌氧菌最好的方法