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三、引物延伸法分析mRNA的端点 引物延伸(primer extension)法主要用于mRNA的 5 末端作图,先要知道该基因的核苷酸序列并预先判断 mRNA的端点位置。 首先在mRNA的预测的5末端下游约150bp位置处,设 计一段互补寡核苷酸引物。以RNA作模板,用反转录 酶延伸该引物,产生的cDNA与mRNA模板互补且其长 度与引物5'末端至mRNA的5末端之间的距离相等。 因此测定cDNA序列就可以推断转录起始位点。 见课本图。三、引物延伸法分析mRNA的端点 引物延伸(primer extension)法主要用于 mRNA 的 5 末端作图,先要知道该基因的核苷酸序列并预先判断 mRNA 的端点位置。 首先在 mRNA 的预测的 5 ‘末端下游约 150bp 位置处,设 计一段互补寡核苷酸引物。以 mRNA 作模板,用反转录 酶延伸该引物,产生的 cDNA 与 mRNA 模板互补且其长 度与引物 5 ’末端至 mRNA 的 5‘ 末端之间的距离相等。 因此测定cDNA序列就可以推断转录起始位点。 见课本图
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