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4.结果到定:从静置后10mi开始观察结果,待对照孔红细胞己沉淀即可进行结果观 察。红细胞全部凝集,沉于孔底,平铺呈网状,即为100%凝集(++),不凝集者(-)红 细胞沉于孔底呈点状。 以100%凝集的病毒最大稀释度为该病毒血凝价,即为一个凝集单位。从表4-1看出, 该新城疫病毒液的血凝价为1:128,则1:128为1个血凝单位,1:64、1:32分别为2、4个 血凝单位,或将128/432,即1:32稀释的病毒液为4个血凝单位。 (仁)血球凝集抑制()试验 1.根据队试验结果,确定病毒的血凝价,配制出4个血凝单位的病毒液。 2.在96孔微量反应板上进行,用固定病毒稀释血清的方法,自第1孔至第11孔各加 50uL生理盐水。 3.第1孔加被检鸡血清50L,吹吸混合均匀,吸50ul至第2孔,依此倍比稀释至第 10孔,吸弃50μL,稀释度分别为:1:2、1:4、1:8…:第12孔加新城疫阳性血清50uL, 作为血清对照。 4.自第1孔至12孔各加50μL4个血凝单位的新城疫病毒液,其中第11孔为4单位新 城狡病毒液对照,振荡混合均匀,置室温中作用10min。 5.白第1孔至12孔各加0.5%鸡红细胞悬液50μL,振荡混合均匀,室温下静置后观察 结果(表4-2)。 表42病毒血凝抑制试验的操作方法(单位:μL) 孔号1 23 5 6 7 8 9 101 12 血清稀释度1:21:41:81:161:321:611:1281:2561:5121:1024对对 生理盐水 5050 504 505 50 50 50 50 50- 50 50 检鸡血清5000 501 50 50J50 50 4单位病毒50505050505050505050 50 50 室温中静置10min Q.我红细电50 50505050505050 50 50 50 50 车去50 钻果观察 +++ 十+++ 2
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