·2 中草药生物技术 3.我国医药生物技术及其产业发展面临的问题…19 二、中草药生物技术的发展前景… 21 1.应用生物技术开展药用植物资源研究及品种选育…21 2.利用植物细胞培养及转基因技术生产次生代谢产物…21 3.分子标记技术在药用植物研究上的应用前景…22 第二章中草药组织培养的基本技术…27 第一节药用植物组织培养技术… …27 一、药用植物组织培养的基本原理… 4…4……4……4小4… 27 1.植物细胞的全能性… 27 2.植物细胞全能性的实现… 28 二、药用植物组织培养的基本技术…… …29 1.植物组织培养的基本设施……… 29 2.常用工具和器皿的准备、清洗和灭菌… 32 3.培养基及其配制…… 33 4。外植体的制备… 38 5.接种与培养… ………40 6.定期检查和细胞学观察… 44 7.生根与移栽…… 44 第二节药用植物组织培养中存在的问题与对策… 47 一、污染的原因及对策… 47 1.真菌性污染及对策… 47 2.细菌性污染及对策… 48 3.常见污染方面的问题及对策… 49 二、褐变现象产生的机制及对策… 50 1.褐变现象产生的影响因素… 50 2.褐变的主要机制……… 51 3.克服褐变现象的对策… 52 三、玻璃化的原因及对策… 53 1.玻璃苗发生的影响因素 53 2.玻璃化主要机制……… 55 3.克服玻璃化现象的对策…… 56 第三章中草药原生质体培养与细胞杂交 60 第一节原生质体培养… 60 一、材料的选择与预处理 61 1.材料的选择… 61 2.材料的预处理… 62 二、原生质体分离与纯化 年4年0年4中年4000年卡？ 62 1.原生质体分离的基本技术… 62 2.原生质体纯化……… ………4…………+… 653. 我国医药生物技术及其产业发展面临的问题 !!!!!!!!!!!!!! 19 二、中草药生物技术的发展前景 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 21 1. 应用生物技术开展药用植物资源研究及品种选育 !!!!!!!!!!!! 21 2. 利用植物细胞培养及转基因技术生产次生代谢产物 !!!!!!!!!!! 21 3. 分子标记技术在药用植物研究上的应用前景 !!!!!!!!!!!!!! 22 第二章 中草药组织培养的基本技术 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 27 第一节 药用植物组织培养技术 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 27 一、药用植物组织培养的基本原理 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 27 1. 植物细胞的全能性 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 27 2. 植物细胞全能性的实现 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 28 二、药用植物组织培养的基本技术 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 29 1. 植物组织培养的基本设施 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 29 2. 常用工具和器皿的准备、清洗和灭菌 !!!!!!!!!!!!!!!!! 32 3. 培养基及其配制 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 33 4. 外植体的制备 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 38 5. 接种与培养 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 40 6. 定期检查和细胞学观察 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 44 7. 生根与移栽 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 44 第二节 药用植物组织培养中存在的问题与对策 !!!!!!!!!!!!!!! 47 一、污染的原因及对策 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 47 1. 真菌性污染及对策 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 47 2. 细菌性污染及对策 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 48 3. 常见污染方面的问题及对策 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 49 二、褐变现象产生的机制及对策 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 50 1. 褐变现象产生的影响因素 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 50 2. 褐变的主要机制 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 51 3. 克服褐变现象的对策 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 52 三、玻璃化的原因及对策 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 53 1. 玻璃苗发生的影响因素 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 53 2. 玻璃化主要机制 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 55 3. 克服玻璃化现象的对策 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 56 第三章 中草药原生质体培养与细胞杂交 !!!!!!!!!!!!!!!!!!! 60 第一节 原生质体培养 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 60 一、材料的选择与预处理 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 61 1. 材料的选择 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 61 2. 材料的预处理 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 62 二、原生质体分离与纯化 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 62 1. 原生质体分离的基本技术 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 62 2. 原生质体纯化 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 65 ·2· 中草药生物技术