基因芯片技术 林晓强16307100046 基因芯片又叫DNA芯片是负责检测和分析基因的。 一.技术原理: 基因芯片的测序原理是杂交测序方法,即通过与一组已知序列的核酸探针杂交进行 核酸序列测定的方法。 双链DNA在高温等条件下双螺旋解开形成两条互补的单链,当消除变性条件后, 变性DNA两条互补链可以重新结合,利用DNA的这种特性,将两个以上不同来源的 多核苷酸链之间由于互补而使它们在复性过程中形成异源杂合分子的过程称为杂交 双链DNA加热变性成为单链,作为探针,将多个探针点在芯片上,然后将用同位 素标记的靶基因接触基因芯片,在消除变性条件下,靶基因与互补的探针结合(如图1), 最后通过确定荧光强度最强的探针位置(如图2),获得一组序列完全互补的探针序列 据此可重组出靶核酸的序列 DNA探针 待测DNA 杂交 色·图2 这个原理看似简单,实际有几个技术难点 1.如何将探针“点”在芯片上?以及芯片种类? 其一:固定在聚合物基片(尼龙膜,硝酸纤维膜等)表面上的核酸探针或CDNA片段,1 / 4 图 1 基因芯片技术 林晓强 16307100046 基因芯片又叫 DNA 芯片是负责检测和分析基因的。 一. 技术原理： 基因芯片的测序原理是杂交测序方法，即通过与一组已知序列的核酸探针杂交进行 核酸序列测定的方法。 双链 DNA 在高温等条件下双螺旋解开形成两条互补的单链，当消除变性条件后， 变性 DNA 两条互补链可以重新结合，利用 DNA 的这种特性，将两个以上不同来源的 多核苷酸链之间由于互补而使它们在复性过程中形成异源杂合分子的过程称为杂交。 双链 DNA 加热变性成为单链，作为探针，将多个探针点在芯片上，然后将用同位 素标记的靶基因接触基因芯片，在消除变性条件下，靶基因与互补的探针结合（如图 1）， 最后通过确定荧光强度最强的探针位置（如图 2），获得一组序列完全互补的探针序列。 据此可重组出靶核酸的序列。 这个原理看似简单，实际有几个技术难点 1. 如何将探针“点”在芯片上？以及芯片种类？ 其一：固定在聚合物基片(尼龙膜，硝酸纤维膜等)表面上的核酸探针或 cDNA 片段， 图 2