实验三溶血试验 红细跑与其相应的抗体（溶血素）发生特异性结合，当加入补体时，抗原抗体复合物通 过经典途径使补体活化，产生膜攻击作用，最后导致红细胞溶解，发生溶血反应。 羊红细胞或鸡细胞+免疫血清（溶血素）+豚鼠血清（补体）一溶血反应。 补体(Complement)是存在于正常人和脊椎动物血清及组织液中一组具有酶原活性的 蛋白质，以豚鼠血清中的补体成分较全且活性高。由于补体对热敏感，56℃30min即被灭 活，室温放置很快失活，0-10℃其活性仅能保持3-4，实验时可以采用新鲜的豚鼠血清。 [目的要求] 1.通过溶血试验，掌握抗原、抗体与补体的关系及作用特点，理解和验证补体被激活 后的溶细胞作用。 2.掌握溶血试验的操作与观察结果的方法。 [材料与试剂] 1.试管，试管架，可调加样器，滴头，滴管，注射器，针头等。 2。灭菌生理盐水，2%山羊红细胞悬液，兔抗山羊红细胞抗体（溶血素），2%鸡红细 胞悬液，兔抗鸡红细胞抗体（溶血素），豚鼠血清。 [实验内容及操作方法] 1,2%山羊（或鸡）红细胞悬液的制备：无菌取山羊（或鸡）抗凝血，离心去血浆，沉淀用 生理盐水洗涤3次，每次2000r/min,离心10min,然后去掉上清液，血细胞泥用生理盐水 配成2%的红细胞悬液。 2.溶血素的制备：将免疫血清（溶血素）用生理盐水稀释成2单位(1：500-1：1000)， 56℃水浴30min灭活。 3.补体的制各：将新鲜豚鼠血清（补体）用生理盐水稀释成1：20，取1ml置56℃水 浴30min灭活。 4.取小试管5支，依次编号。按表3-1加入各成分，摇匀，置37℃水浴30min 5。结果观察：若管底无红细胞沉淀，上层液体红色透明者为完全溶血。若液体呈混浊 或放置后管底有红细胞沉淀为不溶血。 9