锦 标本玻转片 光找 图13显微镜成像原理 图14物镜光线通路 (三)显徽镜的性能 1.分辨率和数值口径 衡量显微镜性能好坏的指标主要是显微镜的分辨率，显微镜的分辨率(Resolving power) 是指显微镜将样品上相互接近的两点清晰分辨出来的能力。它主要取决于物镜的分辨能力， 物镜的分辨力是所用光的波长和物镜数值口径的函数。分辨率用镜头所能分辨出的两点间的 最小距离表示，距离越小，分排能力越好。可用公式表示： D=11 2N.A 物镜的数值口径(Numberical aperture),简写为(NA):表示从聚光镜发出的锥形光柱 照射在观察标本上，能被物镜所聚集的量。可用公式表示： N.A=nsin0 一标本和物镜之间介质的折射率 由光源投射到透镜上的光线和光轴之间的最大夹角 光线投射到物镜的角度越大，数值口径就越大。如果采用一些高折射率的物质作介质， 如使用油镜时采用香柏油作介质，则数值口径增大，从而提高分辩能力。物镜镜筒上标有数 值口径，低倍镜为0.25，高倍镜为0.65，油浸镜为1.25。这些数值是在其它条件都适宜的情 况下的最高值，实际使用时，往往低于所标的值。 2.放大倍数、焦距和工作距离 显微镜的放大倍数是物镜和目镜放大倍数的乘积。放大倍数一样时，由于目镜和物镜搭 配不同，其分辨率也不同。一般来说，增加放大倍数应该是尽量用放大倍数高的物镜。物镜 的放大倍数越大，焦距越短，物镜和样品之间的距离（工作距离）便越短。 (四)显徽镜的使用指南 1.观察前的准备 显微镜的安置：取放显微镜时应一手握住镜臂 一手托住底座，使显微镜保持直立、平 稳。置显微镜于平整的实验台上，镜座距实验台边缘34m。镜检时姿势要端正。 接通电源，根据所用物镜的放大倍数，调节光亮度调节纽、调节虹彩光圈的大小，使视 野内的光线均匀、亮度适宜。 2昆微观察， 1)接通电源，采用白炽灯为光源时，应在聚光镜下加 一蓝色的滤色片，除去黄光 一般情况下，对于初学者，进行显微观察时应遵从低倍镜到高倍镜再到油浸镜的观察程序， 因为低倍镜视野较大，易发现目标及确定检查的位置。 (2)低倍镜观察，将做好的酵母标本片固定在载物台上，用标本夹夹住，移动推进器 图 1-3 显微镜成像原理 图 1-4 物镜光线通路 （三）显微镜的性能 1. 分辨率和数值口径 衡量显微镜性能好坏的指标主要是显微镜的分辨率，显微镜的分辨率（Resolving power） 是指显微镜将样品上相互接近的两点清晰分辨出来的能力。它主要取决于物镜的分辨能力， 物镜的分辨力是所用光的波长和物镜数值口径的函数。分辨率用镜头所能分辨出的两点间的 最小距离表示，距离越小，分辨能力越好。可用公式表示： N A D 2 . 1  = 物镜的数值口径（Numberical aperture），简写为（N.A）：表示从聚光镜发出的锥形光柱 照射在观察标本上，能被物镜所聚集的量。可用公式表示： N.A = nsin n——标本和物镜之间介质的折射率 θ——由光源投射到透镜上的光线和光轴之间的最大夹角 光线投射到物镜的角度越大，数值口径就越大。如果采用一些高折射率的物质作介质， 如使用油镜时采用香柏油作介质，则数值口径增大，从而提高分辩能力。物镜镜筒上标有数 值口径，低倍镜为 0.25，高倍镜为 0.65，油浸镜为 1.25。这些数值是在其它条件都适宜的情 况下的最高值，实际使用时，往往低于所标的值。 2. 放大倍数、焦距和工作距离 显微镜的放大倍数是物镜和目镜放大倍数的乘积。放大倍数一样时，由于目镜和物镜搭 配不同，其分辨率也不同。一般来说，增加放大倍数应该是尽量用放大倍数高的物镜。物镜 的放大倍数越大，焦距越短，物镜和样品之间的距离（工作距离）便越短。 （四）显微镜的使用指南 1. 观察前的准备： 显微镜的安置：取放显微镜时应一手握住镜臂、一手托住底座，使显微镜保持直立、平 稳。置显微镜于平整的实验台上，镜座距实验台边缘 3~4cm。镜检时姿势要端正。 接通电源，根据所用物镜的放大倍数，调节光亮度调节钮、调节虹彩光圈的大小，使视 野内的光线均匀、亮度适宜。 2. 显微观察： （1）接通电源，采用白炽灯为光源时，应在聚光镜下加一蓝色的滤色片，除去黄光。 一般情况下，对于初学者，进行显微观察时应遵从低倍镜到高倍镜再到油浸镜的观察程序， 因为低倍镜视野较大，易发现目标及确定检查的位置。 （2）低倍镜观察，将做好的酵母标本片固定在载物台上，用标本夹夹住，移动推进器