并观察计算转化率 重点内容:质粒DNA的酶切反应。 难点内容:琼脂糖凝胶的制备及电泳。 实验四:植物基因组DNA的提取 要求掌握CTAB法提取植物基因组DNA、基因组DMA的电泳鉴定、PCR扩增目的基因片断 和PCR产物的电泳分析。了解植物基因组DNA提取的原理,和PCR扩增的原理 重点内容:植物基因组DNA的提取。 难点内容:聚合酶链式反应的原理 实验五:植物组织RMA的提取 要求掌握 Trizol法提取植物组织RNA、总RNA的电泳分析。了解植物总RNA提取的原 理 重点内容: Trizol法提取植物组织RNA 难点内容: Trizol法提取植物组织RNA 五、教学时数分配表 序号实验名称 实验类型实验要求实验时数 1大肠杆菌质粒DNA的分离、纯化和鉴定验证性 必做 2质粒DNA酶切及凝胶电泳分析 验证性 3大肠杆菌感受态细胞制备和转化 验证性 必做 4植物基因组DNA的提取 验证性 5植物基因组RNA的提取 验证性必做 442 教学课时合计 六、考核方式及成绩评定标准 考核方式:闭卷考试及实验操作 成绩评定标准:平时成绩占总成绩的30%,期末考试占总成绩的70%。成绩评定为百分 七、教材及主要参考书 教材:朱旭芬编著,《基因工程实验指导》,高等教育出版社,2006 参考书目:[1]吴乃虎编著,《基因工程原理》,科学出版社,1999 [2]张钰主编,《分子生物学基本实验方法》,复旦大学出版社,1998 执笔人:宋达峰,顾青 http:/spxy.zjgsu.edu.cnhttp://spxy.zjgsu.edu.cn 并观察计算转化率。 重点内容：质粒 DNA 的酶切反应。 难点内容：琼脂糖凝胶的制备及电泳。 实验四：植物基因组 DNA 的提取 要求掌握 CTAB 法提取植物基因组 DNA、基因组 DNA 的电泳鉴定、PCR 扩增目的基因片断 和 PCR 产物的电泳分析。了解植物基因组 DNA 提取的原理，和 PCR 扩增的原理。 重点内容：植物基因组 DNA 的提取。 难点内容：聚合酶链式反应的原理。 实验五：植物组织 RNA 的提取 要求掌握 Trizol 法提取植物组织 RNA、总 RNA 的电泳分析。了解植物总 RNA 提取的原 理。 重点内容：Trizol 法提取植物组织 RNA。 难点内容：Trizol 法提取植物组织 RNA。 五、教学时数分配表 序号 实 验 名 称 实验类型 实验要求 实验时数 1 大肠杆菌质粒 DNA 的分离、纯化和鉴定 验证性 必做 4 2 质粒 DNA 酶切及凝胶电泳分析 验证性 必做 2 3 大肠杆菌感受态细胞制备和转化 验证性 必做 4 4 植物基因组 DNA 的提取 验证性 必做 4 5 植物基因组 RNA 的提取 验证性 必做 2 教学课时合计 16 六、考核方式及成绩评定标准 考核方式：闭卷考试及实验操作 成绩评定标准：平时成绩占总成绩的 30%，期末考试占总成绩的 70%。成绩评定为百分 制。 七、教材及主要参考书 教 材：朱旭芬编著，《基因工程实验指导》，高等教育出版社，2006 参考书目：[1] 吴乃虎编著，《基因工程原理》，科学出版社，1999 [2] 张钰主编，《分子生物学基本实验方法》，复旦大学出版社，1998 执笔人:宋达峰，顾 青