四、实验步驟 (详见实验讲义) 1.目的基因cmye与pBR322质粒载体的连接(粘 端) 目的基因片段(14kb),20ng/_2.5μ 注意 载体DNA(43kb),20ng/u 10× buffer 1μl L.加样前短暂离心‖T4DNA连接酶(10U 0.5μl 加样顺序 ddh2o 3.5μl 3.保证每个样品加 总体积:10μl 入其中 混匀,16℃水浴中温育2~4小时,4℃保存 加样完成后混匀‖备 用 后离心 ④④题④题题