446 海洋与湖沼 30卷 类似的病毒分离株的报道(毛树坚等,1988,1989;柯丽华等,1990;王炜等,1990;曾令兵 等、1991.1992王铁辉等,993,1994)。现在习惯统称为草鱼出血病病毒( Hemorrhagic Virus of( Grass Carp、GCHv)(王铁辉等,1995) 2GCHv的形态结构特征 王炜等(1990)对GCHV873毒株进行了电镜观察,发现病毒颗粒呈53:2对称的正廿 面体,双层衣壳外径分别为72±3m和50±2nm;外层衣壳厚123±0.4m,内层衣壳厚 7.2±0.7nm;外层衣壳由92个中空型子粒组成,其中有12个五邻体和80个六邻体,结构 亚单位总数为6.0±04mm;六邻体直径为12.6±0.4mm,中心孔径为7.5±0.4m;衣壳三 角形面边长为42.5m,每边共有4个子粒,GCHV其它毒株均有类似的结构,但报道的病 毒颗粒大小有较大的差异,直径范围在55—80nm(陈燕新等,1983;中国科学院武汉病毒 研究所等,1984a;毛树坚等,1989a;柯丽华等、1990)。这可能是因为各春株大小的确存在 差异,也可能是由于实验误差造成的 另外,毛树坚等(1989b)报道,从忠出血病草鱼病变组织中观察到直径分别为70nm和 2nm左右的两种病毒颗粒,并经分离纯化获得病毒,通过形态学观察、致病性分析、核酸 定性测定,以及在鱼类细胞中的增殖特性研究,证实两者均为草鱼出血病的病原,并认为 前者为草鱼呼肠孤病毒,后者为草鱼小核糖核酸病毒。关于草鱼小核糖核酸病毒导致草 鱼出血病的病理机制以及病原和病症的关系,尚需进一步的探讨(邵健忠等,1990,1992) 电镜下还可看到GCHV的内层核衣壳及所附着的中空圆柱形钉状物,它们位于正廿 面体的12个顶点上,同五邻体子粒的位置一致,长度不及外层衣壳的厚度,不能伸到完整 病毒的外表面,其功能可能与复制时病毒核酸的释放有关,是病毒基因组片段的释放通道 (王炜等,1990)。 3GCHV的化学组成及理化特性 GCHV主要由蛋白质和核酸组成,还含有少量的糖类,以糖蛋白的形成存在,不含脂 类(陈延等,1992),完整病毒在氯化铯中的浮力密度约为1.36g/ml(柯丽华等,1990) GCHV对温度有一定的稳定性,但反复冻融会对病毒感染力有较大影响,病毒对氯仿、乙 醚等有机溶剂有一定的抗性,对酸(pH=3)碱(pH=10)处理不敏感(陈燕新等,1983;张 念慈等、1986),另外.用胰凝乳蛋白酶和酸性溶液处理GCHV病毒滴度都略有上升(曾 令兵等,1992)。 4GCHV的基因组及其所编码的多肽 GCHV基因组由11个 dsRNa(双链核糖核酸)片段组成,不同的毒株之间,病毒基因 组的总分子量差异不大(约15×10D),而各片段分子量有所差异。按分子量大小,11个 片段可分为三组,即较大片段LL2L、)、中等片段(M,M2M)和小片段(S1S2S3S S),见表1 柯丽华等(1992)对GHV-873完整病毒颗粒及其双层衣壳的多肽组成研究结果显 示,组成核病毒颗粒的结构多肽链有11条按其分子量大小分别为VP130(VP表示病毒多 肽,数据为分子量,单位为kd,即130kd,下同)、VPl15、VP100、vP90,VP80、VP73、VP67 VP50、VP43、VP36和P27。其中VP130、VP115.VP67、VP36、VP27为主要成分,这与国 外报道的鱼类水生呼肠孤病毒的多肽组成基本相同( Winton et a,1987)。进一步的研究海 洋 与 湖 沼 类 似 的病 毒 分 离 株 的 报 道 (毛树 坚 等 ，1988，l989a；柯 丽 华 等 ，1990；王 炜 等 ，1990；曾令 兵 等 ，l991．1992；王铁 辉 等 ，l993，l994)。现在 习 惯 统称 为草 鱼 出 血病 病 毒 (Hemorrhagic VirusofGrassCarp GCHV)(王铁 辉 等 ，1995)。 2 GCHV 的形态 结构 特征 王 炜 等 (1990)对 GCI~r873毒 株 进 行 了 电镜 观 察 ，发 现病 毒 颗 粒 呈 5：3：2对 称 的 正 廿 面体 ，双层衣壳．外径分别 为 72±3nm和 5O±2nm；外层 衣壳厚 l23±O．4nm，内层衣壳厚 72±O．7nm；外 层 衣 壳 由 92个 中 空 型 子 粒 组 成 ，其 中有 12个 五 邻 体 和 8O个 六 邻 体 ，结 构 亚单位 总数为 6．0±O4nm；六邻体直径 为 12．6±O．4nm，中心孔径 为 7．5±O．4nm；衣 壳三 角 形 面 边 长 为 42．5nm，每 边共 有 4个 子 粒 GCHV其 它 毒 株 均 有 类 似 的结 构 ，但 报 道 的 病 毒 颗 粒 大 小 有 较 大 的差 异 ，直 径 范 围 在 55- 80nm (陈 燕 新 等 ，1983；中 国 科 学 院 武 汉 病 毒 研 究 所 等 ，l984a；毛 树 坚 等 ，l989a；柯 丽 华 等 ，1990)。这 可 能 是 因为 各 毒 株 大 小 的 确 存 在 差 异 ，也 可能 是 由 于 实 验 误 差 造 成 的 另 外 ，毛树 坚 等 (1989b)报 道 ，从 患 出 血 病 草 鱼 病 变 组 织 中观 察到 直 径 分 别 为 70nm 和 20nm 左 右 的 两 种 病 毒 颗 粒 ，并 经 分 离 纯 化 获得 病 毒 通 过 形 态 学 观 察、致 病 性 分 析 、核 酸 定 性 测 定 ， 及 在 鱼 类 细 胞 中 的增 殖 特 性 研 究 ，证 实 两 者 均 为 草 鱼 出 血 病 的 病 原 ，并 认 为 前者为草鱼 呼肠孤病 毒 ，后者 为草 鱼小 核糖核酸病 毒。关于草鱼小 核糖 核酸病 毒导致草 鱼 出 血 病 的病 理机 制 以 及 病 原 和 病 症 的 关 系 ，尚 需进 一 步 的探 讨 (邵 健 忠 等 ，1990，1992) 电 镜 下 还 可 看 到 GCHV 的 内层 核 衣 壳 及 所 附 着 的 中 空 圆 柱 形 钉 状 物 ，它 们 位 于 正 廿 面体的 12个顶点 上，同五邻 体子 粒的位置 一致 ，长度 不及外层衣壳 的厚度，不 能伸到 完整 病 毒 的 外 表 面 ，其 功能 可 能 与复 制 时病 毒 核 酸 的 释放 有 关 ，是 病 毒 基 因组 片 段 的释 放 通 道 (王 炜 等 ，l990) 3 GcHv的化 学组 成及 理 化特 性 GCHV主要 由蛋 白质和核 酸组成 ，还宙有 少量的糖 类，以糖蛋 白的形 成存在 ，不含脂 类 (陈 延 等 ，1992) 完 整 病 毒 在 氯 化 铯 中 的 浮 力 密 度 约 为 1．36g／m1(柯 丽 华 等 ，1990) GCHV对温度有 一定 的稳定性 ，但反复冻融会 对病毒感染 力有较大影 响 病 毒对氧 仿、乙 醚等 有机溶剂有一定 的抗性 ，对酸 (pH ：3)、碱 (pH： 10)处理不敏感 (陈燕新等 ，1983；张 念慈等 ，1986) 另外 ，用胰凝乳蛋 白酶和酸性溶 液处理 GCHV，病毒滴 度都 略有上 升 (曾 令 兵 等 ，1992)。 4 GCHV 的基 因组及 其 所编 码 的 多肽 GCHV 基 因组 由 11个 dsRNA(双 链 核 糖 核 酸)片 段 组 成 ，不 同 的 毒 椿 之 间 ，病 毒 基 因 组 的总 分 子 量 差 异 不 大 (约 15× 1OD)，而 各 片 段 分 子 量 有 所 差 异 。 按 分 子 量 大 小 ，l】个 片段 可 分 为 三 组 ，即 较 大 片 段 (L．L 、L )、中 等 片 段 (M 、M 、M )和 小 片 段 (S、s，、S、S Ss)，见 表 1 柯 丽 华 等 (1992)对 GcHv一873完 整 病 毒 颗 粒 及 其 双 层 衣 壳 的 多 肽 组 成 研 究 结 果 显 示，组成核 病毒颗 粒的结构多肽链有 ll条 ，按其分子量大小分别 为 VPI30(VP表示病毒多 肽 ，数 据 为 分 子 量 ，单 位 为 kd，即 130kd，下 同)、VPI15、VP100、VP90、VP80、VP73、VP67、 VP50、VP43VP36和 VP27 其 中 VP130 VPI15、VP67、VP36、VP27为 主要 成 分 ，这 与 国 外报道 的鱼类 水生 呼肠孤病 毒 的多肽 组成基本 相同 (Winton etat,1987)。进 一步的研究 维普资讯 http://www.cqvip.com