奈连言路 分子生物学 《分子生物学》实验教学大纲 (供生物技术、生物工程、药学及医学检验本科等专业使用》 前言 本课程实验教学大纲是按照按照国家教委对医学检验本科专业教学要求，根据泰山医学院 自编教材《分子生物学与基因工程实验指导》制定。 本课程实验教学目的是通过该课程实验，使学生通过应用学过的实验技术，了解分子生物 学领域中的新技术、新方法和新进展：系统而深入地掌握核酸分子生物学的基本概念和基本理 论，加深学生对所学知识的理解：培养锻炼学生科学的思维方法，实事求是的科学态度和严格 的科学作风。 一、学时分配表： 实验序号 内 实验学时备注 实骏 大肠杆菌中质粒DNA的提取 必开实验 实验二 质粒D八A的限制性酶切及琼脂糖 3 必开实验（综 凝胶电泳 合性实验) 实验三 PCR基因打扩增 必开实验 实验四 大肠杆菌感受态细胞的制备 4 选开实 实验五 DNA重组与转化技术 选开实验 总学时 18 注：本课程选开实验为2项中选做1项。 、教学内容： 实验一：大肠杆菌中质粒DNA的提取 实验目的：学习和掌握碱裂解法提取质粒。 实验内容：碱裂解法提取大肠杆菌质粒 握：碱裂解法制备质粒 熟悉：菌株的保存和复苏方法，碱裂解法提取质粒溶液的配制方法： 了解：平板法分离单菌落。 实哈一，质欲DA的阴生制性称切及障脂排影胶由就 实验目的：学习和学握质粒DA的酶切技术和琼脂凝胶电泳检测技术 实验内容：质粒D八A的酶切和琼脂糖凝胶电泳检测 掌握：根据目的基因合理选择载体与限制性内切酶以及DNA的酶切技术，琼脂糖凝胶电泳分 离DNA的原理与方法： 熟悉：检测DA纯度、含量与分子量大小的方法： 了解：核酸检测的其他方法 实验三：PCR基因扩增 实验目的：学习和掌握常规PCR技术，引物设计的一殷要求 实验内容：PCR基因扩增 掌握：常规PCR技术的原理和一般操作方法 熟悉 PCR引物设计的一般要求： 了解：PCR程序的优化，RT-PCR的原理