甘肃农业大学《园艺植物组织培养》课程教案 章节 第二章第三节（2学时) 教学 掌握无菌接种时外植体的消毒方法，接种器械的消毒方法，接种时外植体的切取要求， 目的 接种时的注意事项。使学生全面掌握植物无菌接种的一一般步骤。 与要 求 教学 植物组织无菌培养一般分为五个步骤： 内容 外植体消毒 接种器械消毒 切取外植体材料 接种 封口 重点、 重点：介绍园艺植物组织培养的概念意义和应用途径，园艺植物组织培养的特点。 难点 难点：园艺植物组织培养的原理和类型。 分析 教学设计 调控对策 (主要有引入、展开（方法、手段）、归纳总结、作业等项目) 通过举例说明外植体带菌后容易在培养基上吸收养分，而使培养材料自身的生 长受到抑制，甚至死亡。导入必须进行外植体消毒的原因，介绍外植体消毒的基本 方法及一般操作。首先是外植体的消毒，第一步是将采来的植物材料除去不用的部 分，将需要的部分仔细洗干净，如用适当的刷子等刷洗，硬的材料用刮刀刮。把材 料切割成适当大小，即灭菌容器能放入为宜。置自来水龙头下流水冲洗几分钟至数 小时，冲洗时间视材料清洁程度而宜。第二步是对材料的表面浸润灭菌。第三步是 用灭菌剂处理。最后一步是用无菌水涮洗，涮洗要每次3分钟左右，视采用的消毒 液种类，涮洗3一10次左右。其次是接种器械消毒。第三是无菌操作，主要由空气 中的细菌和工作人员本身引起，接种室要严格进行空间消毒。第四是接种具体操 作是：先解开包口纸，将试管几乎水平拿着，试管口靠近酒精灯焰，将管口在火焰 上方转动，让管口里外灼烧数秒钟，若用棉塞盖口，可先在管口外面灼烧，去掉棉 塞，再烧管口里面。然后用镊子夹取一块外植体送入试管内，轻轻插入培养基上。 接完种后，将管口在火焰上再灼烧数秒钟。若用棉塞，塞好后，包上包口纸，包 口纸里面也要过火。 作业：简单叙述接种的一般操作程序及注意事项