66c3fc5bd 7fb4e 79a 126fe6132749ab5 dow 第三节检识方法一颜色反应 颜色反应 强心苷的颜色反应很多,根据颜色反应发生在分子的不同部位可以分为以下数种: 1.作用于甾体母核的反应 般在无水条件下,经强酸(如硫酸、磷酸、高氯酸)、中等强度的酸(如三氯乙酸)或 lewis 酸(如三氯化锑、二氯化锌等)的作用,甾体化合物经脱水形成双键、双键移位,分子间缩合形成 共轭双键系统,并在浓酸溶液中形成多烯阳碳离子的盐而呈现一系列的颜色变化。常见的反应有: (1)乙酐浓硫酸反应( Liebermann- Burchard反应):取试样溶于冰醋酸,加浓硫酸-醋酐(1: 20)混合液数滴,反应液呈黄→红→蓝→紫→绿等变化,最后褪色。 (2) Tschugaev反应:取试样溶于冰醋酸,加无水氯化锌及乙酰氯后煮沸,或取试样溶于氯仿 或二氯甲烷,加冰醋酸、乙酰氯和氯化锌煮沸,反应液呈紫→红→蓝→绿等变化,B环有不饱和双 键的作用更快 (3)磷酸反应 (4) Salkowskiⅰ反应:将试样溶于氯仿,沿试管壁加入浓硫酸,静置,氯仿层呈血红色或青色, 硫酸层有绿色荧光 (5)三氯乙酸氯胺T( chloramine t)反应:将试样醇溶液点在滤纸(或薄板)上,喷以三氯 醋酸-氯胺T试剂(25%三氯醋酸乙醇溶液4皿加3%氯胺T水溶液1ml混匀),待纸片干后,100℃ 加热数分钟,于紫外光下观察。该反应可初步区别洋地黄类的苷元 (6)三氯化锑反应 2.作用于a、β不饱和内酯环的反应 甲型强心苷在碱性醇溶液中,双键由20(22)转移到20(21),生成C活性亚甲基,能与下 列活性亚甲基试剂作用而显色,乙型强心苷不能产生活性亚甲基,故无此类反应。具体的有: (1)亚硝酰铁氰化钠试剂( Legal反应) (2)间二硝基苯试剂( Raymond反应):反应机理是间二硝基苯与活性亚甲基缩合后,又经过 量间二硝基苯氧化成醌式而显色。此法可用于薄层色谱和纸色谱显色,喷雾后显紫红色,5~10分钟 褪色 (3)3,5-二硝基苯甲酸试剂( Kedde反应):原理与间二硝基苯试剂反应类似,本试剂可作 为强心苷纸色谱和薄层色谱的显色试剂,喷雾后显紫红色,几分钟后褪色。 (4)碱性苦味酸试剂( Ballet反应):《药典》以此法测定强心苷类药物含量 以上反应均呈红或紫红、橙红色。 3.作用于a-去氧糖的反应 (1) Keller- Kiliani(K-K)反应:该反应为α-去氧糖的特征性反应,对游离的α-去氧糖或 在此条件下能水解产生游离a-去氧糖的苷都能反应 (2)监吨氢醇反应 (3)过碘酸-对硝基苯胺反应:该反应原理是:过碘酸将α-去氧糖氧化成丙二醛,丙二醛与硝 基苯胺试剂反应呈深黄色 (4)对一硝基苯肼反应 (5)对-二甲氨基苯甲醛反应:分子中含有a-去氧糖的强心苷可显灰红色斑点。66c3fc5bd7fb4e79a126fe6132749ab5.doc 6 第三节 检识方法—颜色反应 一、颜色反应 强心苷的颜色反应很多，根据颜色反应发生在分子的不同部位可以分为以下数种： 1. 作用于甾体母核的反应 一般在无水条件下，经强酸（如硫酸、磷酸、高氯酸）、中等强度的酸（如三氯乙酸）或 lewis 酸（如三氯化锑、二氯化锌等）的作用，甾体化合物经脱水形成双键、双键移位，分子间缩合形成 共轭双键系统，并在浓酸溶液中形成多烯阳碳离子的盐而呈现一系列的颜色变化。常见的反应有： （1）乙酐浓硫酸反应（Liebermann-Burchard 反应）：取试样溶于冰醋酸，加浓硫酸-醋酐（1∶ 20）混合液数滴，反应液呈黄→红→蓝→紫→绿等变化，最后褪色。 （2）Tschugaev 反应：取试样溶于冰醋酸，加无水氯化锌及乙酰氯后煮沸，或取试样溶于氯仿 或二氯甲烷，加冰醋酸、乙酰氯和氯化锌煮沸，反应液呈紫→红→蓝→绿等变化，B 环有不饱和双 键的作用更快。 （3）磷酸反应 （4）Salkowski 反应：将试样溶于氯仿，沿试管壁加入浓硫酸，静置，氯仿层呈血红色或青色， 硫酸层有绿色荧光。 （5）三氯乙酸氯胺 T（chloramine T）反应：将试样醇溶液点在滤纸（或薄板）上，喷以三氯 醋酸-氯胺 T 试剂（25%三氯醋酸乙醇溶液 4 ml 加 3%氯胺 T 水溶液 1ml 混匀），待纸片干后，100℃ 加热数分钟，于紫外光下观察。该反应可初步区别洋地黄类的苷元。 （6）三氯化锑反应 2. 作用于 α、β 不饱和内酯环的反应 甲型强心苷在碱性醇溶液中，双键由 20（22）转移到 20（21），生成 C22 活性亚甲基，能与下 列活性亚甲基试剂作用而显色，乙型强心苷不能产生活性亚甲基，故无此类反应。具体的有： （1）亚硝酰铁氰化钠试剂（Legal 反应） （2）间二硝基苯试剂（Raymond 反应）：反应机理是间二硝基苯与活性亚甲基缩合后，又经过 量间二硝基苯氧化成醌式而显色。此法可用于薄层色谱和纸色谱显色，喷雾后显紫红色，5~10 分钟 褪色。 （3）3，5-二硝基苯甲酸试剂（Kedde 反应）：原理与间二硝基苯试剂反应类似，本试剂可作 为强心苷纸色谱和薄层色谱的显色试剂，喷雾后显紫红色，几分钟后褪色。 （4）碱性苦味酸试剂（Baljet 反应）：《药典》以此法测定强心苷类药物含量。 以上反应均呈红或紫红、橙红色。 3. 作用于 α-去氧糖的反应 （1）Keller-Kiliani（K-K）反应：该反应为α-去氧糖的特征性反应，对游离的α-去氧糖或 在此条件下能水解产生游离α-去氧糖的苷都能反应。 （2） 吨氢醇反应 （3）过碘酸-对硝基苯胺反应：该反应原理是：过碘酸将α-去氧糖氧化成丙二醛，丙二醛与硝 基苯胺试剂反应呈深黄色。 （4）对-硝基苯肼反应 （5）对-二甲氨基苯甲醛反应：分子中含有α-去氧糖的强心苷可显灰红色斑点