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四氢呋喃冰水 甲醇/水 Cb(甲醇/水 D点:同样的容量因子,四氢呋喃 D点:萘非极性强,k大,斜率陡 用量少 CA B A AD A点甲、乙二溶质分不开,B点比 A点分不开,要寻找不是交叉点的 C点冲洗剂浓度高,但k小,省时 D点的Cb浓度为分离条件 间,所以选B点好 所以,改变C浓度,保留值k'和选择性α都改变了,寻找最佳的Cb浓度就是HPLC 高效液相色谱技术的精髓所在 例如,通常用10%~90%的甲醇/水,梯度洗脱30min,即可找出适宜的Cb浓度。 用高浓度Cb洗脱,可保证先将所有的峰都洗脱出来,不丢失组份,然后再调节Cb 浓度,找到更好的分离效果,加大各组份色谱峰的分离度。 甲醇降低10%,k'可降低2~3倍 147147 lnk’ lnk’ 萘 四氢呋喃/水 D 甲醇/水 苯 Cb D Cb (甲醇/水) D 点:同样的容量因子,四氢呋喃 D 点:萘非极性强,k’大,斜率陡 用量少 lnk’ 甲 lnk’ 乙 C A B Cb A A D A Cb A 点甲、乙二溶质分不开,B 点比 A 点分不开,要寻找不是交叉点的 C 点冲洗剂浓度高,但 k’小,省时 D 点的 Cb 浓度为分离条件 间,所以选 B 点好。 所以,改变 Cb 浓度,保留值 k’和选择性α都改变了,寻找最佳的 Cb 浓度就是 HPLC 高效液相色谱技术的精髓所在。 例如,通常用 10%~90%的甲醇/水,梯度洗脱 30min,即可找出适宜的 Cb 浓度。 用高浓度 Cb 洗脱,可保证先将所有的峰都洗脱出来,不丢失组份,然后再调节 Cb 浓度,找到更好的分离效果,加大各组份色谱峰的分离度。 甲醇降低 10%,k’可降低 2~3 倍
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