德阿昆哈假单胞( Pseudomonas dacunhae)68变异株的培养 斜面培养基组成(%)为蛋白胨0.25,牛肉膏0.52,酵母膏025,NaCl0.5, pl7.0,琼脂2.0。种子培养基与斜面培养基,不加琼脂,250ml三角烧 瓶中培养基装量40ml。摇瓶培养基组成(%)为L一谷氨酸3.0,蛋白 胨,酪蛋臼水解液0.5,磷酸二氢钾0.05,MgSO47H2O0.01,用氨水 调pH72,500ml三角烧瓶中培养基装量为8oml。将培养24h的新鲜斜 面菌种接种于种子培养基中,30℃振摇培养8h,再接种于摇瓶培养基 中,30℃振摇培养24h,逐级放大。 2)细胞固定化 E coli的细胞固定化 取湿菌体20kg,悬浮于生理盐水中,保温至40℃,再加入90L保温至40℃ 的12%明胶溶液及101.0%戊二醛溶液,充分搅拌均匀,放置冷却凝 固,再浸入0.25%戊二醛溶液中。于5℃过夜后,切成3~5mm的立体 小方块,浸入0.25%戊二醛溶液5℃过夜,蒸馏水充分洗涤,滤干得含 天冬氨酸酶得固定化德阿昆哈假单胞（Pseudomonas dacunhae）68变异株的培养 斜面培养基组成（％）为蛋白胨0.25，牛肉膏0.52，酵母膏0.25，NaCl0.5， pH7.0，琼脂2.0。种子培养基与斜面培养基，不加琼脂，250ml三角烧 瓶中培养基装量40ml。摇瓶培养基组成（％）为L－谷氨酸3.0，蛋白 胨，酪蛋白水解液0.5，磷酸二氢钾0.05，MgSO4 .7H2O 0.01，用氨水 调pH7.2，500ml三角烧瓶中培养基装量为80ml。将培养24h的新鲜斜 面菌种接种于种子培养基中，30℃振摇培养8h，再接种于摇瓶培养基 中， 30℃振摇培养24h，逐级放大。 2）细胞固定化 E coli的细胞固定化 取湿菌体20kg，悬浮于生理盐水中，保温至40℃，再加入90L保温至40℃ 的12％明胶溶液及10L1.0％戊二醛溶液，充分搅拌均匀，放置冷却凝 固，再浸入0.25％戊二醛溶液中。于5℃过夜后，切成3～5mm的立体 小方块，浸入0.25％戊二醛溶液5℃过夜，蒸馏水充分洗涤，滤干得含 天冬氨酸酶得固定化