7.再次在1000rpm离心10分钟,去上清液。 8.视细胞的多少加入适量的固定液。 9.制片:取一张先在冰箱(0-4℃)中的清洁载玻片,用滴管吸取1一4滴细胞悬液,用嘴 吹气使细胞分散,再通过火焰使其干燥。 10.用6-8%Giemsa染液(改良苯酚品红染液)染色20-30分钟。用清水冲洗后镜检。 11.镜检:找出减数分裂各个时期的细胞。 五、作业: 绘出你所看到的鸡减数分裂中各时期简图。 附:染液的配制 l.Giemsa原液 称重1克Giemsa染料,溶于66毫克干油中(研钵中研细,置56℃恒温水浴锅90分钟),冷却 后,加入65毫升甲醇混合,过滤装入棕色瓶中备用。此液为原液。 2.磷酸盐缓冲液配制 取2.2gNa2HP04·12H20和0.55gNaH2P04·2H20置于100m1容量瓶中,加入约30ml蒸馏水溶解 后用蒸馏水定容至100ml,PH值为7.0-7.2。 3.Giemsa.工作液 姬姆萨染液的配制方法为原液、缓冲液、蒸馏水的比例为2:3:5。 4.改良苯酚品红溶液的配制。 ①复红原液 碱性品红 3g 70%酒精 100ml ②染色液 复红原液 10ml 5%苯酚水溶液 90m1 冰醋酸 10ml 甲醛 10m1 (染液配成后,放置24小时,过滤后方可使用)