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熔解曲线绘制与分析 SYBR Green染料没有序列特异性,可以结合到包括非特异产物和 引物率体在由的任何mNM 田出有以丽下公日坛信旦和假信号。 0024 ℃仪 0020 检测基因 器会am 内参 在T 值下 0.012 得到单 峰的; 受到非 特异 ,说明 有非1,疋墨阳不吵1w。熔解曲线绘制与分析 SYBR Green 染料没有序列特异性,可以结合到包括非特异产物和 引物二聚体在内的任何 dsDNA 上。因此有必要区分目标信号和假信号。 在整个PCR完成后进行,从 60 ℃升至 95 ℃ ,每升高 0.5 ℃ 仪 器会自动收集荧光信号,得到的熔解曲线是逐渐下降的过程,且在 Tm 值下降最快。为方便分析,将温度与荧光强度的变化求导。如果得到单 峰的熔解曲线,就可以证明该扩增反应的特异性好,实验结果未受到非 特异性扩增和引物二聚体的干扰,定量结果可靠。若有其他小峰,说明 有非特异干扰,定量结果不够准确。 检测基因 内参
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