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(2)工艺过程 1)收集、浮选取新鲜牛血,离心除去血浆。 2)溶血、去血红蛋白:干净红细胞加水溶血30min,然 后加入0.25倍体积的乙醇和0.15倍体积的氯仿,搅拌 15min,离心去血红蛋白,收集上清液。 3)沉淀、热变性:将上述清液加入12~1.5倍体积的丙 酮,产生大量絮状的沉淀,离心得沉淀物。再将沉淀 物加适量水,离心去不溶物,上清液于60~70℃热处 理10分钟,离心去沉淀得浅绿色得澄清液 4)柱层析、洗脱、超滤浓缩:将上述澄清液超滤浓缩后 小心加到已用25mmoL,pH76磷酸缓冲液平衡好的 DEAE- sephadex a50柱上吸附,并用pH76的25~ 50mmo/L的磷酸盐缓冲液进行梯度洗脱,收集具有 SOD活性的洗脱液 5)冷冻干燥(2)工艺过程 1)收集、浮选 取新鲜牛血,离心除去血浆。 2)溶血、去血红蛋白:干净红细胞加水溶血30min,然 后加入0.25倍体积的乙醇和0.15倍体积的氯仿,搅拌 15min,离心去血红蛋白,收集上清液。 3)沉淀、热变性:将上述清液加入1.2~1.5倍体积的丙 酮,产生大量絮状的沉淀,离心得沉淀物。再将沉淀 物加适量水,离心去不溶物,上清液于60~70℃热处 理10分钟,离心去沉淀得浅绿色得澄清液。 4)柱层析、洗脱、超滤浓缩:将上述澄清液超滤浓缩后 小心加到已用2.5mmol/L,pH7.6磷酸缓冲液平衡好的 DEAE-sephadex A50柱上吸附,并用pH7.6的2.5~ 50mmol/L的磷酸盐缓冲液进行梯度洗脱,收集具有 SOD活性的洗脱液。 5)冷冻干燥
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