8 1.掌握组织培养常用实验器材（玻璃器皿、橡胶制品、正负压除菌滤器、塑料制品）的清洗 要领、清洗步骤和注意事项。 2.掌握组织培养常用器材的包装要领和要求。 3.了解灭菌方法，掌握高压湿热灭菌方法及操作注意事项。 4.掌握除菌滤器的安装、使用和拆除方法及操作注意事项。 二、实验用品 玻璃器皿：组织培养所用的玻璃器皿应由透明度好、无菌的中性硬质玻璃制成。常用的 有以下几种：螺旋口培养瓶、培养皿、注射器、用生理盐水瓶代替的贮存瓶、青霉素瓶、尖 吸管、烧杯、量筒等。 器械：解剖刀、眼科剪和镊子（直头和弯头）。 杂用品：各种规格胶塞、记号笔、搪瓷盘、吸头、酒精灯、酒精、牛皮纸等。 实验十八 组织原代培养 一、实验目的 2. 掌握组织取材、剪切和器械使用等。 3. 进一步练习无菌操作技术，了解各实验器材的使用。 二、实验用品 （一） 器材 超净工作台、CO2 孵箱、培养箱、高压蒸汽消毒锅、过滤器、抽滤瓶、真空泵、倒置显微镜、 培养皿、培养瓶、小烧杯、量筒、吸管、注射器、解剖器械全套、电动搅拌器。 （二）试剂： 1. Hank’s 液 称取 NaCl 8.00g，KCl 0.40g，CaCl2 0.14g，MgSO4•7H2O 0.20g，Na2HPO4•H2O 0.06g， NaH2PO4 0.06g，NaHCO3 0.35g，葡萄糖 1.00g，酚红 0.02g 依次溶于 1000ml H2O 中，调 pH 至 7.2～7.4。 2. 原代培养液 量取 RPMI-1640 培养液 80～85 mL，小牛血清 15～20 mL，青霉素 100 IU/mL，链霉素 100 IU /mL，用 5.6％NaHCO3 调 pH 6.8～7.0。细菌滤器滤过除菌，4℃冰箱保存。 3. 75％酒精 4. 5％碘酊 （三）材料 鸡胚或鸭胚 实验十九培养组织的观察 一、实验目的8 1.掌握组织培养常用实验器材（玻璃器皿、橡胶制品、正负压除菌滤器、塑料制品）的清洗 要领、清洗步骤和注意事项。 2.掌握组织培养常用器材的包装要领和要求。 3.了解灭菌方法，掌握高压湿热灭菌方法及操作注意事项。 4.掌握除菌滤器的安装、使用和拆除方法及操作注意事项。 二、实验用品 玻璃器皿：组织培养所用的玻璃器皿应由透明度好、无菌的中性硬质玻璃制成。常用的 有以下几种：螺旋口培养瓶、培养皿、注射器、用生理盐水瓶代替的贮存瓶、青霉素瓶、尖 吸管、烧杯、量筒等。 器械：解剖刀、眼科剪和镊子（直头和弯头）。 杂用品：各种规格胶塞、记号笔、搪瓷盘、吸头、酒精灯、酒精、牛皮纸等。 实验十八 组织原代培养 一、实验目的 2. 掌握组织取材、剪切和器械使用等。 3. 进一步练习无菌操作技术，了解各实验器材的使用。 二、实验用品 （一） 器材 超净工作台、CO2 孵箱、培养箱、高压蒸汽消毒锅、过滤器、抽滤瓶、真空泵、倒置显微镜、 培养皿、培养瓶、小烧杯、量筒、吸管、注射器、解剖器械全套、电动搅拌器。 （二）试剂： 1. Hank’s 液 称取 NaCl 8.00g，KCl 0.40g，CaCl2 0.14g，MgSO4•7H2O 0.20g，Na2HPO4•H2O 0.06g， NaH2PO4 0.06g，NaHCO3 0.35g，葡萄糖 1.00g，酚红 0.02g 依次溶于 1000ml H2O 中，调 pH 至 7.2～7.4。 2. 原代培养液 量取 RPMI-1640 培养液 80～85 mL，小牛血清 15～20 mL，青霉素 100 IU/mL，链霉素 100 IU /mL，用 5.6％NaHCO3 调 pH 6.8～7.0。细菌滤器滤过除菌，4℃冰箱保存。 3. 75％酒精 4. 5％碘酊 （三）材料 鸡胚或鸭胚 实验十九培养组织的观察 一、实验目的