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图2 AgO○OO 2.加样 在靠正极的孔内加稀释抗体,在靠负板的孔内加抗原。 3.电泳 在平板电泳槽里倒进离子强度μ=0.05的巴比妥缓冲液。将凝胶板平放在电泳槽中的隔 板上。琼脂的两端用浸温的滤纸做桥与电泳槽的电极缓冲液相连接,抗体端接正极。通电, 电流强度按琼脂板的宽度计算(1-2mAcm)。观察到白色沉淀线时,即电泳完毕(一般1小 时左右)。 可快速测定抗体效价 实验(五)微量免疫电泳 免疫电泳法( immunoelectrophoresis)是把蛋白质电泳分离技术(琼脂电泳)和免疫学 检测技术(双向扩散)结合起来的检测方法。此法在微量的基础上具有分辨率高,灵敏度高 时间短,是很理想的分离和鉴定蛋白质混合物的方法。用于抗原、抗体定性及纯度的测定 在临床诊断方面也有应用价值 实验目的 学习凝胶内分离蛋白质的电泳技术与利用抗原抗体的特异性反应的免疫扩散技术结合 起来,分析鉴定抗原或者抗体的免疫化学方法。 器材及试剂 1.指示蛋白:溴酚蓝染色的牛血清白蛋白 2.切割琼脂板的小刀 3.牙签272 2. 加样 在靠正极的孔内加稀释抗体,在靠负板的孔内加抗原。 3. 电泳 在平板电泳槽里倒进离子强度=0.05 的巴比妥缓冲液。将凝胶板平放在电泳槽中的隔 板上。琼脂的两端用浸温的滤纸做桥与电泳槽的电极缓冲液相连接,抗体端接正极。通电, 电流强度按琼脂板的宽度计算(1-2mA/cm)。观察到白色沉淀线时,即电泳完毕(一般 1 小 时左右)。 可快速测定抗体效价。 实验(五) 微量免疫电泳 免疫电泳法(immunoulectrophoresis)是把蛋白质电泳分离技术(琼脂电泳)和免疫学 检测技术(双向扩散)结合起来的检测方法。此法在微量的基础上具有分辨率高,灵敏度高, 时间短,是很理想的分离和鉴定蛋白质混合物的方法。用于抗原、抗体定性及纯度的测定。 在临床诊断方面也有应用价值。 一. 实验目的 学习凝胶内分离蛋白质的电泳技术与利用抗原抗体的特异性反应的免疫扩散技术结合 起来,分析鉴定抗原或者抗体的免疫化学方法。 二. 器材及试剂 1. 指示蛋白:溴酚蓝染色的牛血清白蛋白 2. 切割琼脂板的小刀 3. 牙签
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