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将切下的根尖放在0.4一0.2%的秋水仙碱溶液处理2一5小时,然后用水冲几次,或将材料放入 蒸馏水中,在0一3℃的条件下处理24小时。 3厨定 在醋酸一纯酒精(1:3)固定15一30分钟,然后用95%酒精洗净其醋酸移入70%酒精中,在阴 凉处保存。 4、解离 将根从固定液中取出,用流水冲洗10分钟,放入1mo1/1盐酸中,于60℃下水解10分钟,或 置盐酸酒精(盐酸与95%酒精各半),取出水洗1一2次。 5、染色和压片 取解离后的根尖于载玻片上,滴加几滴改良碱性品红或醋酸洋红染液。放置约10分钟,待根尖 染成暗红色,加盖玻片,用吸水纸放在盖玻片上面,用右手拇指在吸水纸上对准根尖轻压,或用解 部针柄端轻轻敲击,将根尖材料压成一均匀薄层,注意不要移动盖玻片。 6、镜检 将所做玻片置显微镜下观察 可看到有丝分裂过程中不同分裂时期的染色体,为了观察染色体 形态结构和进行计数,应找到分裂中期的细胞,若染色嫌浅,可从盖玻片一侧加酒液,同时在另 侧用滤纸片吸染料,又可将载玻片在酒精灯上微微加热,染色体着色效果更好些。 901$6相7⊙ 910 8219012 洋葱根尖的培养 1,培养洋数牛根时避免用新采收的洋葱,因它尚在休眠不易生根,培养过程中.注章每天至少换水一 次,以防烂根。 如果必须用当年刚采收的新洋葱培养生根,则应设法打破它的休眠。常用的方法是用低浓度的赤霉素 溶液浸泡洋葱底盘,这样可以促使其生根。 2.对于头年收下的洋葱,可以采用如下方法促使它生根 (1)洗择底盘大的洋效作生根材料。 (②)剥去外层老皮,用刀削去老根(从底盘中央向四周削),注意不要削掉四周的“根芽” 3)用烧杯装 清水,放 放置在 黑处。水要保持清洁,注意每天换水 次 般23 即可获得实验所需材料,如果班级较多,为了防止后用的班级所需的洋葱根长得过长,也可以放入冰 箱里(1一2℃)培养, 3.固定时间取材:洋葱根尖细胞有丝分裂的时间是有规律的。通常在每天上午10时至下午2时分裂 活跃,尤其以上午11时30分时最活跃,可在这时取材 解离时,也可将剪取的2一3mm洋葱根尖浸入浓盐酸和酒精的体积分数为95%的溶液各半的混合液中, 浸20~30mi。这样,根尖细胞被杀死,细胞间质被溶解,细胞容易分离。 .7 PDF文件使用"pdfFactory Pro”试用版本创建www,fineprint.cn- 7 - 将切下的根尖放在 0.4-0.2%的秋水仙碱溶液处理 2-5 小时,然后用水冲几次,或将材料放入 蒸馏水中,在 0-3℃的条件下处理 24 小时。 3、固定 在醋酸—纯酒精(1:3)固定 15-30 分钟,然后用 95%酒精洗净其醋酸移入 70%酒精中,在阴 凉处保存。 4、解离 将根从固定液中取出,用流水冲洗 10 分钟,放入 1mol/l 盐酸中,于 60℃下水解 10 分钟,或 置盐酸酒精(盐酸与 95%酒精各半),取出水洗 1-2 次。 5、染色和压片 取解离后的根尖于载玻片上,滴加几滴改良碱性品红或醋酸洋红染液。放置约 10 分钟,待根尖 染成暗红色,加盖玻片,用吸水纸放在盖玻片上面,用右手拇指在吸水纸上对准根尖轻压,或用解 部针柄端轻轻敲击,将根尖材料压成一均匀薄层,注意不要移动盖玻片。 6、镜检 将所做玻片置显微镜下观察,可看到有丝分裂过程中不同分裂时期的染色体,为了观察染色体 形态结构和进行计数,应找到分裂中期的细胞,若染色嫌浅,可从盖玻片一侧加酒液,同时在另一 侧用滤纸片吸染料,又可将载玻片在酒精灯上微微加热,染色体着色效果更好些。 洋葱根尖的培养 1.培养洋葱生根时,避免用新采收的洋葱,因它尚在休眠不易生根。培养过程中,注意每天至少换水一 次,以防烂根。 如果必须用当年刚采收的新洋葱培养生根,则应设法打破它的休眠。常用的方法是用低浓度的赤霉素 溶液浸泡洋葱底盘,这样可以促使其生根。 2.对于头年收下的洋葱,可以采用如下方法促使它生根。 (1)选择底盘大的洋葱作生根材料。 (2)剥去外层老皮,用刀削去老根(从底盘中央向四周削),注意不要削掉四周的“根芽”。 (3)用烧杯装满清水,放上洋葱,放置在光照处。水要保持清洁,注意每天换水 1~2 次。一般 2~3 d 即可获得实验所需材料。如果班级较多,为了防止后用的班级所需的洋葱根长得过长 ,也可以放入冰 箱里(1~2 ℃)培养。 3.固定时间取材:洋葱根尖细胞有丝分裂的时间是有规律的。通常在每天上午 10 时至下午 2 时分裂 活跃,尤其以上午 11 时 30 分时最活跃,可在这时取材。 实验注意事项 解离时,也可将剪取的 2~3 mm 洋葱根尖浸入浓盐酸和酒精的体积分数为 95%的溶液各半的混合液中, 浸 20~30 min。这样,根尖细胞被杀死 ,细胞间质被溶解,细胞容易分离。 PDF 文件使用 "pdfFactory Pro" 试用版本创建 www.fineprint.cn
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