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成匀浆,离心,分成核、线粒拉体、微粒体及上清等组分。发现微粒体中的放射性强度最高 再用去污剂(如脱氧胆酸)处理微粒体,将核糖体从内质网中分离出来,发现核糖体的放 射强度比微粒体的要高7倍。这就说明核糖体是合成蛋白质的部位。 核糖体是一个巨大的核糖体蛋白体。在原核细胞中,它可以游离形式存在,也可以与 mRNA结合形成串状的多核糖体。平均每个细胞约有2000个核糖体。真核细胞中的核糖 体既可游离存在,也可以与细胞内质树相结合,形成粗植内质网。每个真核细胞所含核糖 体的数目要多得多,为10-10个。线粒体、叶绿体及细胞核内也有自己的核糖体。表11-5 总结了不同生物核糖体的一些特性。 表11-5核糖体的某些特性 核糖体种类 亚基 RNA(分子量) 蛋白质分子数目 原核细胞核糖休 30s 16S(5.510 21 (以大肠杆茵为例 70s r5S(0.4103) 34 50s 235(11010) 40S 18S(7010) n30 真核细胞核糖体 -5s(0410) ∽50 60 128-295(140-180105) 核糖体含3种RNA和55种蛋白质,这些成分如何组装成具有活性的核糖体,是 个值得深入研究的问题。在1968年第一次完成了大肠杆菌核糖体小亚基由其RNA和蛋 白质在体外的重新组装。这个重组装的颗粒具有与30S亚基功能完全相同的蛋白质合成活 性。重组装只需16SNA和21种蛋白质,而不需要加入其它组分(如酶或特殊因子),表 明这是一个“自我组装”(self-assembly)的过程。所谓自我组装,是指进行组装所需要的 全部信息都在亚基结构里,其蛋白质和RNA都带有规定组装过程的信息。自我组装的驱 动力包括水性相互作用、氢键和离子相互作用,以及碱基堆叠之间的相互作用等。 讲一一步的研究发现,这个组装过程有一定顺序,即某种蛋白质的加入要先于其它蛋白 质的加入。而且各组分的加入是有协同作用的,即一种组分的加入加强了下一种组分的加 入。图11-4概略地表示出大肠杆菌核糖体的30S和50S亚基的组装过程。在30S亚基的 组装过程中,以16SRNA为骨架,先与15种蛋白质结合(实际上,这些蛋白质的结合也 有先后),形成21S颗粒。然后再加上其余6种蛋白质,最后组装成30S亚基。这个组装 过程,可能在16SRNA转录开始之后即行发生,因为在RNA链上结合最强的部位,都 集中在最先转录的5端。 大肠杆菌核糖体50S亚基的组装比较复杂,它包括两种(23S和5S)rRNA,而且蛋白 质数目也较多。先由23SRNA,5SRNA与约20种L蛋白结合,生成33S颗粒。然后再 加上其余蛋白质,组装成41S颗粒。最后在Mg2+(0C)和50℃下转变为50S亚基。 336336 成匀浆,离心,分成核、线粒体、微粒体及上清等组分。发现微粒体中的放射性强度最高。 再用去污剂(如脱氧胆酸)处理微粒体,将核糖体从内质网中分离出来,发现核糖体的放 射强度比微粒体的要高 7 倍。这就说明核糖体是合成蛋白质的部位。 核糖体是一个巨大的核糖体蛋白体。在原核细胞中,它可以游离形式存在,也可以与 mRNA 结合形成串状的多核糖体。平均每个细胞约有 2 000 个核糖体。真核细胞中的核糖 体既可游离存在,也可以与细胞内质网相结合,形成粗糙内质网。每个真核细胞所含核糖 体的数目要多得多,为 10 6 ~10 7个。线粒体、叶绿体及细胞核内也有自己的核糖体。表 11-5 总结了不同生物核糖体的一些特性。 表 11-5 核糖体的某些特性 核糖体种类 亚基 rRNA(分子量) 蛋白质分子数目 原核细胞核糖体 (以大肠杆菌为例) 30S 70S 50S 16S(5.5 10 5) 5S(0.4 10 5) 23S(110 10 5) 21 34 真核细胞核糖体 40S 80S 60S 18S(∽70 10 5) 5S(0.4 10 5) 28-29S(140-180 10 5) ∽30 ∽50 核糖体含 3 种 rRNA 和 55 种蛋白质,这些成分如何组装成具有活性的核糖体,是一 个值得深入研究的问题。在 1968 年第一次完成了大肠杆菌核糖体小亚基由其 rRNA 和蛋 白质在体外的重新组装。这个重组装的颗粒具有与 30S 亚基功能完全相同的蛋白质合成活 性。重组装只需 16SrRNA 和 21 种蛋白质,而不需要加入其它组分(如酶或特殊因子),表 明这是一个“自我组装”(self-assembly)的过程。所谓自我组装,是指进行组装所需要的 全部信息都在亚基结构里,其蛋白质和 rRNA 都带有规定组装过程的信息。自我组装的驱 动力包括水性相互作用、氢键和离子相互作用,以及碱基堆叠之间的相互作用等。 进一步的研究发现,这个组装过程有一定顺序,即某种蛋白质的加入要先于其它蛋白 质的加入。而且各组分的加入是有协同作用的,即一种组分的加入加强了下一种组分的加 入。图 11-4 概略地表示出大肠杆菌核糖体的 30S 和 50S 亚基的组装过程。在 30S 亚基的 组装过程中,以 16SrRNA 为骨架,先与 15 种蛋白质结合(实际上,这些蛋白质的结合也 有先后),形成 21S 颗粒。然后再加上其余 6 种蛋白质,最后组装成 30S 亚基。这个组装 过程,可能在 16SrRNA 转录开始之后即行发生,因为在 rRNA 链上结合最强的部位,都 集中在最先转录的 5ˊ端。 大肠杆菌核糖体 50S 亚基的组装比较复杂,它包括两种(23S 和 5S)rRNA,而且蛋白 质数目也较多。先由 23SrRNA,5SrRNA 与约 20 种 L 蛋白结合,生成 33S 颗粒。然后再 加上其余蛋白质,组装成 41S 颗粒。最后在 Mg 2+(0℃)和 50℃下转变为 50S 亚基
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