实验2坐骨神经一腓肠肌标本制备(必修) [目的与原理] 掌握机能学实验的基本组织分离技术;掌握蟾蜍坐骨神经-腓肠肌标本制备的基本操作 方法 蟾蜍等两栖类动物的某些基本生命活动和生理功能与温血动物相似,其离体组织的实 验条件较简单且易于控制,在杋能实验中常用蛙或蟾蜍坐骨神经-腓肠肌标本观察神经、刖 肉兴奋性、刺激与反应的关系及肌肉收缩等某些基本特性或活动规律 [实验对象] 蟾蜍或蛙。 [试剂与器材] 任氏液、蛙板、玻璃板、粗剪刀、手术剪、镊子、金属探针、玻璃钩针、蛙钉、滴管、 培养皿、锌铜弓、烧杯。 [实验步骤] 1、破坏脑脊髓 (1)取蟾蜍一只,用自来水冲洗干浄。左手握住蟾蜍,用食指按其头部使之略向前屈 拇指按住其背部,其余三指则握住蟾蜍的四肢和腹部,其手法如图1-7-1A (2)用右手持金属探针,在头颅后缘,自枕骨大孔与脊椎管之间刺入椎管,先左右摆 动,离断脊髓:再向前插入颅腔,向左右摆动数次,捣毁全部脑组织,如探针确已插入颅腔 则向各方向摆动时,即有触及颅骨的感觉。 3)将探针撤回至枕骨大孔,但不拔出皮肤,直接向后插入脊椎管,直达骶部,轻轻 转动探针,以破坏脊髓。如探针确已在脊椎管中,则不能左右摆动,探针不得穿透脊椎 以免损伤内脏。最后拔出探针,用小棉球堵塞创口以止血。 脑脊髓破坏完全后,蟾蜍将失去一切反射活动,全身肌肉软瘫。如动物仍有反射动作, 表示破坏不彻底,必须重新破坏。 2、去皮和制作下肢标本 A破坏脑脊髓 B剪断脊柱 C去掉躯干及内脏 D刺去下肢皮肤 图1-7-1破坏蟾蜍脑脊髓及剥去皮肤 (1)左手握住蟾蜍的脊柱,用粗剪刀在前肢腋窝处,将脊柱横断,并沿脊柱两侧避开 坐骨神经剪开腹壁,此时头、躯干上部及内脏全部下垂,剪除头、全部躯干及内脏组织,剪7 实验 2 坐骨神经—腓肠肌标本制备（必修） [目的与原理] 掌握机能学实验的基本组织分离技术；掌握蟾蜍坐骨神经-腓肠肌标本制备的基本操作 方法。 蟾蜍等两栖类动物的某些基本生命活动和生理功能与温血动物相似，其离体组织的实 验条件较简单且易于控制，在机能实验中常用蛙或蟾蜍坐骨神经-腓肠肌标本观察神经、肌 肉兴奋性、刺激与反应的关系及肌肉收缩等某些基本特性或活动规律。 [实验对象] 蟾蜍或蛙。 [试剂与器材] 任氏液、蛙板、玻璃板、粗剪刀、手术剪、镊子、金属探针、玻璃钩针、蛙钉、滴管、 培养皿、锌铜弓、烧杯。 [实验步骤] 1、破坏脑脊髓： （1）取蟾蜍一只，用自来水冲洗干净。左手握住蟾蜍，用食指按其头部使之略向前屈， 拇指按住其背部，其余三指则握住蟾蜍的四肢和腹部，其手法如图 1-7-1A。 （2）用右手持金属探针，在头颅后缘，自枕骨大孔与脊椎管之间刺入椎管，先左右摆 动，离断脊髓；再向前插入颅腔，向左右摆动数次，捣毁全部脑组织，如探针确已插入颅腔， 则向各方向摆动时，即有触及颅骨的感觉。 （3）将探针撤回至枕骨大孔，但不拔出皮肤，直接向后插入脊椎管，直达骶部，轻轻 转动探针，以破坏脊髓。如探针确已在脊椎管中，则不能左右摆动，探针不得穿透脊椎管， 以免损伤内脏。最后拔出探针，用小棉球堵塞创口以止血。 脑脊髓破坏完全后，蟾蜍将失去一切反射活动，全身肌肉软瘫。如动物仍有反射动作， 表示破坏不彻底，必须重新破坏。 2、去皮和制作下肢标本： 图 1-7-1 破坏蟾蜍脑脊髓及剥去皮肤 （1）左手握住蟾蜍的脊柱，用粗剪刀在前肢腋窝处，将脊柱横断，并沿脊柱两侧避开 坐骨神经剪开腹壁，此时头、躯干上部及内脏全部下垂，剪除头、全部躯干及内脏组织，剪