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八、 Protein的分离纯化及鉴定 (一) Protein的提取(300) 1、选材: 2、破碎:常用的方法有硏磨法、超声波法、冻融法和酶解法等机械破碎法。 3、提取: (二) Protein的分离纯化 1、盐析法:中性盐分级沉淀法,常用的盐为硫酸铵。不同的蛋白质由 于所带的电荷和水化程度不同,盐析时所需的盐的浓度也不相同,因而可以 将不同的蛋白质加以分离 2、等电点沉淀法:净电荷为零,分子之间的静电排斥力最小,因而容易聚集 形成沉淀。该法适用于在等电点p稳定的蛋白质。 3、有机溶剂沉淀法:甲醇、乙醇、丙酮等(保持低温),破坏蛋白质 的水化层,使蛋白质的溶解度降低而沉淀。八、 Protein的分离纯化及鉴定 (一)Protein的提取(300页) 1、选材: 2、破碎:常用的方法有研磨法、超声波法、冻融法和酶解法等机械破碎法。 3、提取: (二)Protein的分离纯化 1、盐析法:中性盐分级沉淀法,常用的盐为硫酸铵。不同的蛋白质由 于所带的电荷和水化程度不同,盐析时所需的盐的浓度也不相同,因而可以 将不同的蛋白质加以分离。 2、等电点沉淀法:净电荷为零,分子之间的静电排斥力最小,因而容易聚集 形成沉淀。该法适用于在等电点pH稳定的蛋白质。 3、有机溶剂沉淀法:甲醇、乙醇、丙酮等(保持低温),破坏蛋白质 的水化层,使蛋白质的溶解度降低而沉淀
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