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究工作。 以上是直接测生长量的。 二、计繁殖数 是要一个一个计算微生物细胞的数目,通常用来测定样品中所含细菌、孢子、 酵母菌等单细胞微生物的数量,计数法可分为直接计数法和间接计数法两类。 直接法 这类方法是利用特定的细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容 积里样品中微生物的数量。这种方法的缺点是不能区分死细胞与活细胞。 计数板是一块特制的载玻片,上面有一个特定的面积1mm2和高为0.lmm的 计数室,在1m2的面积里又被刻划成25个或16个中格,每个中格进一步划分 成16个或25个小格,但计数室都是由400个小格组成。 将稀释的样品的在计数板上,盖上盖玻片,然后在显微镜下计算4-5个中格 的细南数,并求出每个小格所含细南的平均数,再按下面公式求出每毫升样品所 含的细菌数。 每毫升原液所含细南数=每小格平均细菌数×400×1000×稀释倍数 在我们数细菌个数的时候,为了解决死活细菌不分的缺陷,常常将细菌用特 殊染料进行染色,通常死、活细南染出米的颜色是不一样的,一般用美蓝液对酵 母菌染色,活细胞无色,而死细胞被染成蓝色,因此可以分别计数 间接法 这种方法又叫活菌计数法,其原理是每个活细菌在适宜的培养基和良好的生 长条件下可以通过生长形成菌落。将待测液样品经一系列10倍稀释,然后选择 三个稀释度的菌液,分别取0.2l.放入无菌平皿,再倒入适量的已融化并冷却至 45℃左右的培养基,与菌液混匀,冷却,待凝固后放入适宜温度的培养箱或温室 培养,长出菌落后,计数,按下面公式计算菌液的含菌数。 每毫升原菌液活菌数=同一稀释度三个以上重复平皿菌落平均数×稀释倍数 X5 根据以上原理,可以将活菌计数法分为多种类型: 平板菌落计数法 这种方法就是我们上面说的将菌液和固体培养基混合到平板,计算细菌在固
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