最重要的进展之一 ,又如，有一天，别人给贝尔纳的实验室送来了几只从市场上买来的兔子。贝尔注意到实验桌上免子排的尿清亮而带酸性 不象寻常草食动物那样混浊而带碱性 他推断，这多半是由于没有喂食，免子从自己身体的组织中吸取养份，因而处于食肉动物的营养状况 他用喂养和禁食互相交替的方法证实了这个观点，这种作用过程果然使免尿反应发生了预期的变化。这是一次精彩的观察，多效研究人员也就 心满意足了，但贝尔纳却不然。他要求“反证”，于是用肉食喂免子，果然不出所料，免尿呈酸性，贝尔纳为完成这项实验，最后对免子作了解 剖。用他自己的话说我偶然注意到白色乳状的淋巴液初见于离幽门约三十压米处十二指肠下部的小肠中。这引起了我的注意，因为在狗的身 上淋巴液初见于十二指肠的上部紧靠近密门的地方，“再仔细观察，他看到胰导管的开口是与淋巴液开始含有白色乳禀的位置一致，脂肪质的 乳状液使这种乳糜成为白色，这样就发现了胰液在脂肪消化中的作用。 菜夫勒(Friedrich Loffer,.l852~191S)德国细菌学家，在白喉研究的早期。证明了实验动物因注射白喉杆菌而死亡时，细菌仍留 在注射点的附近.他认为动物死亡是由细菌的毒素所适成。根据这一假说，鲁(Emile Roux,1853~1933法国细菌学家、医生)做了大量动物 实验，企图证实细菌培养液中的这种毒素，虽做了很多努力，却都失败了。尽管如此，鲁仍坚信这一假说，最后孤注一掷，给豚鼠注射了35毫 升的大剂量培养液滤液，奇怪的是，这只酥鼠在注射了如此大剂量的液体居然没有立即死亡，过了一些时候，他满意地看到这只豚鼠死于白喉 中毒。确认了这点以后，鲁很快就查明，这只豚鼠开始只所以不死是因为培养液中细菌培养时间不够长，产生的毒素不足所致。因而，增加细 菌培养时间就能够制成毒性很大的滤液，这一发现导致了预防白喉的免疫法，并使抗血清用于治疗(1890年Von Behring?发现患白喉病愈后豚 鼠的血清中含有某种物质，可以保护其他豚鼠)，从而开始了抗毒素治疗的新的时代。 7.冯梅林(Baron Joseph Von Mering,.I849-1908)德国内科医生，闵可夫斯基(Oscar Minkowsk,1858-1931),出生于俄国的内 科医学、病理学家。1889年在斯待拉斯堡研究胰脏在消化过程中的功能时，用手术切除了一个狗的胰脏。过后，一个实验助手发现这只狗的尿 招来了成群的苍蝇。他将些事报告给了闵可夫斯基，经分析尿后发现其中有糖。正是这一发现，使我们认识了糖尿病和后来用胰岛素控制德尿 病的方法，胰岛素是由Banting和Bcst二氏从家犬体内首次分离出的，这一发现拯救了无数糠尿病患者的生命. 8.里基特(Charles Ricet)法国生理学家，在用实验动物试验海葵触手提取物，以测定其毒索剂量时，突然发现，与第一次相隔一段时 间第二次的微小剂量常使动物迅速死亡。起先他对此大为震惊，简直不能相信这是他自己做出来的结果。确实，他说过，他发现诱导敏感作用 或称过敏性完全是不知不觉的，他原来认为这是绝对不可能的。这种过敏感现象的的另一表现是由戴尔(Henry Dale)发现的。他在豚鼠的 几条不随意肌内注射血洁时，突然发现有一条肌肉对马血洁反应特别强烈，在寻找这一特别现泉的原因时，他发现这只题鼠在不久前曾注射过 马血清。由于前次已注射过马血清（称感应剂量）使豚鼠对马血清（异性蛋白）感受提高，因此第二次再注射马血清（称决定性剂量）时豚鼠 可比第一次注射反应强烈得多。这证实了过敏的本质是抗原抗体的反应，从而推动了变态反应性装疾病的研究。 ).洛伊(O0L®ew),格次茨大学药物学教授。1921年，他以创造性的思维，仅采用简单的动物实验方法，就发现了副交感神经的神 经介质为乙酰胆险。“次日他走进实验室，以生物学历史上少有的利落、简单、肯定的实验证明了神经冲动的化学媒介作用。他准备了两只蛙 心，用盐水使其保持跳动。他刺激一只蛙心的迷走神经，使其停止跳动。然后他把浸泡过这只蛙心的盐水取出来浸泡第二只蛙心.洛伊满意地 看到：盐水对第二只蛙心的作用，同刺激来迷走神经对第 一只蛙心的作用相同：动的肌肉停止了跳动。这就是世界各国对化学煤介作用不仅 在于经与它们影响肌肉和体之间 而日也方在烛经单本息之间 0甘 化学致物质的发现：1914年日本人山极和市川用沥青长朗涂抹免耳朵，功地诱发出皮肤，后经分析沥青中丰要含有3，装花的化 学致物，从而证实了化学物质的致癌作用。从此，许多化学物质都相继被证实可经诱发动物的肿，为肿 病因的化学因提供了更多的证 。使人们充合认识到化学致因素在人类恶性的东因中占有极要的地位 现在已知的有致作用的化堂物质。种类装多。布广 皮肤。，注射在动物皮下可引起肉。基里氟染料。可引起动物肝停和瞻。芳香胺举染料。可引起瞻跳，其中芳吞雅类如N.乙 程基苏)可使多种动物引起旺肠乳外耳道陕不同部位的融。亚消陆类化合生足 类分布广，致性强，能引起多种动物及 多种器宫发生肿瘤的天然存在的致篇物 对的亚硝胺主要引起食管 二甲基亚硝胺 一其亚 胺等对称亚销酸， 的的 910】国内科医生生理学家在对体的吉蛙小班讲行实给日 生理盐水作为第波田这方可吉娃小时推 小时的 次，在伦敦大学医院 位生理学家发现他的青链心胜连续动了 好凯个小时 能原因 后来 液时用的不 据这 盐份引起了生理 的 牌结节法测 拿大血液学家在研究正常小鼠骨髓细跑放射敏。 对受 时的小 移稻 细后 109 出腕 在苦味 以肉 脾脏表 从而包 弹结节的生 别关 步的 作询正 这类细 行分化的 P的 成细胞为多向性造血干 多潜能性造 F细 洁法是目前公认的多向性造血干细胞的测定方法， 它的发现大大 进了血液学的 单克隆抗体技术的发明 杂交(Hy om )合成单克隆抗体 (M antibodies)的近年来生物度学中的 一项重大突破。从根 上解决了免学 存在的~特异性“和重复性"问题 显出它的发展前途无可限昆 单克降抗体技术是由英剑桥大学两位科学家G cr和 n于1975年发明的 他们在 0年代发展起来的细孢杂交技术基础 功地把两种细胞融合在 起 种是已适应体外培苏的小鼠骨酚座细 (都来自BALB/C品系的小鼠)和一种经绵羊红细胞免疫的小鼠细胞最重要的进展之一。又如，有一天，别人给贝尔纳的实验室送来了几只从市场上买来的兔子。贝尔注意到实验桌上兔子排的尿清亮而带酸性， 不象寻常草食动物那样混浊而带碱性。他推断，这多半是由于没有喂食，兔子从自己身体的组织中吸取养份，因而处于食肉动物的营养状况。 他用喂养和禁食互相交替的方法证实了这个观点，这种作用过程果然使兔尿反应发生了预期的变化。这是一次精彩的观察，多数研究人员也就 心满意足了，但贝尔纳却不然。他要求“反证”，于是用肉食喂兔子，果然不出所料，兔尿呈酸性，贝尔纳为完成这项实验，最后对兔子作了解 剖。用他自己的话说“我偶然注意到白色乳状的淋巴液初见于离幽门约三十厘米处十二指肠下部的小肠中。这引起了我的注意，因为在狗的身 上淋巴液初见于十二指肠的上部紧靠近幽门的地方。”再仔细观察，他看到胰导管的开口是与淋巴液开始含有白色乳糜的位置一致，脂肪质的 乳状液使这种乳糜成为白色，这样就发现了胰液在脂肪消化中的作用。 6． 莱夫勒（Friedrich Loffler,1852～1915）德国细菌学家，在白喉研究的早期，证明了实验动物因注射白喉杆菌而死亡时，细菌仍留 在注射点的附近。他认为动物死亡是由细菌的毒素所造成。根据这一假说，鲁（Emile Roux,1853～1933法国细菌学家、医生）做了大量动物 实验，企图证实细菌培养液中的这种毒素，虽做了很多努力，却都失败了。尽管如此，鲁仍坚信这一假说，最后孤注一掷，给豚鼠注射了35毫 升的大剂量培养液滤液，奇怪的是，这只豚鼠在注射了如此大剂量的液体居然没有立即死亡，过了一些时候，他满意地看到这只豚鼠死于白喉 中毒。确认了这点以后，鲁很快就查明，这只豚鼠开始只所以不死是因为培养液中细菌培养时间不够长，产生的毒素不足所致。因而，增加细 菌培养时间就能够制成毒性很大的滤液，这一发现导致了预防白喉的免疫法，并使抗血清用于治疗（1890年Von Behring发现患白喉病愈后豚 鼠的血清中含有某种物质，可以保护其他豚鼠），从而开始了抗毒素治疗的新的时代。 7．冯梅林（Baron Joseph Von Mering,1849-1908）德国内科医生，闵可夫斯基（Oscar Minkowsk,1858～1931），出生于俄国的内 科医学、病理学家。1889年在斯特拉斯堡研究胰脏在消化过程中的功能时，用手术切除了一个狗的胰脏。过后，一个实验助手发现这只狗的尿 招来了成群的苍蝇。他将些事报告给了闵可夫斯基，经分析尿后发现其中有糖。正是这一发现，使我们认识了糖尿病和后来用胰岛素控制糖尿 病的方法。胰岛素是由Banting和Best二氏从家犬体内首次分离出的，这一发现拯救了无数糠尿病患者的生命。 8．里基特（Charles Ricet）法国生理学家，在用实验动物试验海葵触手提取物，以测定其毒素剂量时，突然发现，与第一次相隔一段时 间第二次的微小剂量常使动物迅速死亡。起先他对此大为震惊，简直不能相信这是他自己做出来的结果。确实，他说过，他发现诱导敏感作用 或称过敏性完全是不知不觉的，他原来认为这是绝对不可能的。这种过敏感现象的的另一表现是由戴尔（Henry Dale）发现的。他在豚鼠的 几条不随意肌内注射血清时，突然发现有一条肌肉对马血清反应特别强烈。在寻找这一特别现象的原因时，他发现这只豚鼠在不久前曾注射过 马血清。由于前次已注射过马血清（称感应剂量）使豚鼠对马血清（异性蛋白）感受提高，因此第二次再注射马血清（称决定性剂量）时豚鼠 可比第一次注射反应强烈得多。这证实了过敏的本质是抗原抗体的反应，从而推动了变态反应性疾病的研究。 9．洛伊（Otto Loewi），格次茨大学药物学教授。1921年，他以创造性的思维，仅采用简单的动物实验方法，就发现了副交感神经的神 经介质为乙酰胆硷。“次日他走进实验室，以生物学历史上少有的利落、简单、肯定的实验证明了神经冲动的化学媒介作用。他准备了两只蛙 心，用盐水使其保持跳动。他刺激一只蛙心的迷走神经，使其停止跳动。然后他把浸泡过这只蛙心的盐水取出来浸泡第二只蛙心。洛伊满意地 看到：盐水对第二只蛙心的作用，同刺激来迷走神经对第一只蛙心的作用相同：搏动的肌肉停止了跳动。这就是世界各国对化学媒介作用不仅 在于神经与它们影响肌肉和腺体之间，而且也存在于神经单元本身之间。” 10．其他一些著明科学家采用动物实验获得重大发现的例子还很多，如： 化学致癌物质的发现：1914年日本人山极和市川用沥青长期涂抹兔耳朵，成功地诱发出皮肤癌，后经分析沥青中主要含有3，4-苯骈芘的化 学致癌物，从而证实了化学物质的致癌作用。从此，许多化学物质都相继被证实可经诱发动物的肿瘤，为肿瘤病因的化学因素提供了更多的证 据。使人们充分认识到化学致癌因素在人类恶性肿瘤的病因中占有极重要的地位。现在已知的有致癌作用的化学物质，种类繁多，分布广泛。 如3，4-苯骈芘、1，2，5，6-双苯蒽、20-甲基胆蒽等多环碳氢化合物，均被动物实验证明是强烈的致癌物质。用这些物质涂抹动物皮肤可引起 皮肤癌，注射在动物皮下则可引起肉癌。氨基偶氮染料，可引起动物肝癌和膀胱癌。芳香胺类染料，可引起膀胱癌，其中芳香酰类（如N-2-乙 酰氨基芴）可使多种动物引起肝、肠、乳膜、外耳道、膀胱等不同部位的肿瘤。亚硝胺类化合生是一类分布广，致癌性强，能引起多种动物及 多种器官发生肿瘤的天然存在的致癌物，甲基苄基亚硝胺、甲基丙烯基亚硝胺等不对称的亚硝胺主要引起食管癌；二甲基亚硝胺、二乙基亚硝 胺等对称亚硝胺，主要引起肝癌；甲基亚硝基脲和甲基亚硝基乌拉坦能诱发大鼠的小肠、肝、肾、脑的肿瘤和胃的腺癌。 Ringer′s液的发现：林格（Sidney Ringer,1835～1910）英国内科医生、生理学家。在对离体的青蛙心脏进行实验时，生理学家通常使用 生理盐水作为灌液。用这种方法可使青蛙心脏继续保持约半小时的跳动。一次，在伦敦大学医院，一位生理学家发现他的青蛙心脏连续跳动了 好几个小时，他非常惊讶，大惑不解，他能想到的唯一可能原因是季节的影响，而这一点他也确实的报告中提出来了。后来，发现这是由于他 的实验助手在制作盐水溶液时用的不是蒸馏水而是自来水。根据这个线索断定自来水中的某些盐份引起了生理活动的增加。林格就是这样发现 了这种以他名字命名的溶液。这种溶液对实验生理学的贡献颇大。 脾结节法测定多向造血干细胞方法的发现：1961年J.E.Till和E.A.McCulloch两位加拿大血液学家在研究正常小鼠骨髓细胞放射敏感性时， 对受致死剂量射线照射的小鼠移植一定数量的同种骨髓细胞后9～10天，取出脾脏，在苦味酸一甲醛固定液中固定后，可以肉眼见到脾脏表面 上生成圆形结节。从而创立了脾结节法。同时他们进一步观察到脾结节的生成量与移植骨髓的有核细胞数之间呈比例关系，因此，可以作为评 定骨髓细胞功能的一个重要测定方法，为测定造血细胞的功能提供了一个定量的研究方法，后来，进一步的工作证明，脾结节的生成是起源于 单一细胞的，这类细胞具有很强的增殖能力，同时又具有向骨髓红系、粒系和巨核系细胞进行分化的能力，符合了造血干细胞的基本特征，因 而称脾结节的生成细胞为多向性造血干细胞或多潜能性造血干细胞。因此脾结法是目前公认的多向性造血干细胞的测定方法，它的发现大大促 进了血液学的研究。 单克隆抗体技术的发明：杂交瘤（Hybidoma）合成单克隆抗体（Monoclonal antibodies）的近年来生物医学中的一项重大突破。从根本 上解决了免疫学中长期存在的“特异性”和“重复性”问题，显出它的发展前途无可限最。 单克隆抗体技术是由英国剑桥大学两位科学家G.Kohler和C.Milstein于1975年发明的，他们在60年代发展起来的细胞杂交技术基础上，成 功地把两种细胞融合在一起，一种是已适应体外培养的小鼠骨髓瘤细胞（都来自BALB/C品系的小鼠）和一种经绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞