备小分子抗体,如Fab、Fⅴ和单链抗体(SFv)。近年发展的抗体库技术使人源抗体制备获 得突破。抗体库技术系指用基因克隆技术将全套抗体重链及轻链可变区基因克隆岀来,重 组到原核表达载体,通过大肠杆菌直接表达有功能的抗体分子片段,最后筛选到特异的可 变区基因。抗体库技术应用了新发展的PCR技术,用一组引物即可克隆出全套抗体的可变 区基因。另一项突破技术是大肠杆菌成功表达分泌型抗体分子片段。目前应用的有组合抗 体库技术和噬菌体抗体库技术。另外用基因工程方法还可制备双特异抗体( bispecific antibody,BsAb),又称双功能抗体( bifunctional antibody)。BsAb与天然抗体有许多不 同之处,它可同时与两种抗原发生反应并使之交联,可使某种效应因子定位于靶细胞,是 制备免疫毒素( immunotoxin)俗称生物导弹的重要技术。过去用化学交联或细胞工程方法 制备BsAb,但难以达到应用阶段。而基因工程BsAb,采用小抗体分子片段如Fab、Fv或ScFv, 经基因操作在体外或细胞内组装,直接表达BsAb。国内在日本血吸虫疫苗候选分子单克隆 抗独特型抗体的人源化改造研究已经起步。 3.寄生虫病免疫诊断技术发展趋势 寄生虫感染的确诊一般应依靠病原学诊断。有些组织寄生虫病原诊断较困难,必须发 展分子或免疫诊断技术。由于病原学检査耗时耗力,一般不适于现场大规模普查,加之多 年防治工作的实施,寄生虫感染度明显降低,而病原学检测在低感染中敏感性较差,因此 需要简便快速准确的免疫学检测方法。免疫学方法在寄生虫病诊断中已广泛应用,但此类 方法仅能作为辅助诊断工具。目前应用最多的是抗体检方法,此类方法敏感性和特异性较 好,但缺点是治疗后抗体仍长期存在于宿主血淸中,难以区别现症感染与既往感染。近年 来迅速发展的有疗效考核价值的循环抗原检测和短程抗体检测方法已开始用于寄生虫病诊 断。下面简述寄生虫病免疫诊断技术发展趋势 (1)单克隆抗体(MAb)将完全或部分取代多克隆抗血清,因为MAb具有特异性强,只 与抗原分子上某一抗原决定簇结合,质地始终如一,重复性好;可用少量不纯抗原、全细 胞和组织粗提物作为免疫原;以及可大批量生产等优点 (2)将用Fab’或F(ab’)2片段而不是整分子IgG,因为片段可除外Fc的干扰,进一步 提高检测的特异性 3)双抗体夹心 ELISA引入放大系统可使敏感度提高10~100倍 (4)双特异抗体(BsAb)和抗独特型抗体(anti- idiotypic antibody),重组抗原,肽 抗原等将更多地用于寄生虫病免疫诊断 (5)定量技术的发展,有助于提高诊断和基础研究水平。快速诊断技术如金标渗滤法5 备小分子抗体，如 Fab、Fv 和单链抗体（SFv）。近年发展的抗体库技术使人源抗体制备获 得突破。抗体库技术系指用基因克隆技术将全套抗体重链及轻链可变区基因克隆出来，重 组到原核表达载体，通过大肠杆菌直接表达有功能的抗体分子片段，最后筛选到特异的可 变区基因。抗体库技术应用了新发展的 PCR 技术，用一组引物即可克隆出全套抗体的可变 区基因。另一项突破技术是大肠杆菌成功表达分泌型抗体分子片段。目前应用的有组合抗 体库技术和噬菌体抗体库技术。另外用基因工程方法还可制备双特异抗体（bispecific antibody, BsAb），又称双功能抗体（bifunctional antibody）。BsAb 与天然抗体有许多不 同之处，它可同时与两种抗原发生反应并使之交联，可使某种效应因子定位于靶细胞，是 制备免疫毒素（immnotoxin）俗称生物导弹的重要技术。过去用化学交联或细胞工程方法 制备 BsAb，但难以达到应用阶段。而基因工程 BsAb，采用小抗体分子片段如 Fab、Fv 或 ScFv， 经基因操作在体外或细胞内组装，直接表达 BsAb。国内在日本血吸虫疫苗候选分子单克隆 抗独特型抗体的人源化改造研究已经起步。 3．寄生虫病免疫诊断技术发展趋势 寄生虫感染的确诊一般应依靠病原学诊断。有些组织寄生虫病原诊断较困难，必须发 展分子或免疫诊断技术。由于病原学检查耗时耗力，一般不适于现场大规模普查，加之多 年防治工作的实施，寄生虫感染度明显降低，而病原学检测在低感染中敏感性较差，因此 需要简便快速准确的免疫学检测方法。免疫学方法在寄生虫病诊断中已广泛应用，但此类 方法仅能作为辅助诊断工具。目前应用最多的是抗体检方法，此类方法敏感性和特异性较 好，但缺点是治疗后抗体仍长期存在于宿主血清中，难以区别现症感染与既往感染。近年 来迅速发展的有疗效考核价值的循环抗原检测和短程抗体检测方法已开始用于寄生虫病诊 断。下面简述寄生虫病免疫诊断技术发展趋势： ⑴ 单克隆抗体（MAb）将完全或部分取代多克隆抗血清，因为 MAb 具有特异性强，只 与抗原分子上某一抗原决定簇结合，质地始终如一，重复性好；可用少量不纯抗原、全细 胞和组织粗提物作为免疫原；以及可大批量生产等优点。 ⑵ 将用 Fab’或 F(ab’)2 片段而不是整分子 IgG，因为片段可除外 Fc 的干扰，进一步 提高检测的特异性。 ⑶ 双抗体夹心 ELISA 引入放大系统可使敏感度提高 10～100 倍。 ⑷ 双特异抗体（BsAb）和抗独特型抗体（anti-idiotypic antibody），重组抗原，肽 抗原等将更多地用于寄生虫病免疫诊断。 ⑸ 定量技术的发展，有助于提高诊断和基础研究水平。快速诊断技术如金标渗滤法