实验八硝酸还原酶活性测定 一、目的 硝酸还原酶是植物氮素代谢中的关键酶之一，它与作物吸收利用氮肥有关， 对作物的产量和品质有影响。因而可以把硝酸还原酶的活力当作植物营养或农田 施肥的指标之一，也可作为品种选育的指标之一。通过本实验可初步掌握测定硝 酸还原酶活性的原理与方法。 二、原理 硝酸还原酶能将NO;还原成NO2 NO5+NADH+H整ENO5+NAD·+0 产生的NO2ˉ的量与硝酸还原酶的活性相关。通过测定反应液中产生的NO2 含量，即可确定酶活性大小。 NO2ˉ含量可用磺胺显色法测定。NO2ˉ与磺胺及a一萘胺在酸性条件下生成红 色偶氮化合物其反应如下： NH, N=N +NO+2H*+CH +2H,O HCI S03 NH: (红色偶氮化合物) 酶活性可用单位鲜重组织在单位时间内产生的亚硝酸量来表示： 亚硝酸态氮微克数/克鲜重组织1小时。 三、实验材料、仪器和试剂 1.实验材料植物的根、茎、叶，本实验选用白萝卜叶片 2.仪器 (1)分光光度计(2)离心机(3)真空泵和真空干燥器 (4)恒温水浴锅(5)恒温箱(6)刻度吸管(1ml、2ml、5ml) (7)试管 (8)天平(9)三角瓶(50ml) 3.试剂 (1)亚硝酸钠标准液：称取0.1000g亚硝酸钠(AR),用蒸馏水溶解并定容实验八 硝酸还原酶活性测定 一、目 的 硝酸还原酶是植物氮素代谢中的关键酶之一，它与作物吸收利用氮肥有关， 对作物的产量和品质有影响。因而可以把硝酸还原酶的活力当作植物营养或农田 施肥的指标之一，也可作为品种选育的指标之一。通过本实验可初步掌握测定硝 酸还原酶活性的原理与方法。 二、原 理 硝酸还原酶能将 NO3 －还原成 NO2 － 产生的 NO2 －的量与硝酸还原酶的活性相关。通过测定反应液中产生的 NO2 － 含量，即可确定酶活性大小。 NO2 －含量可用磺胺显色法测定。NO2 －与磺胺及 a－萘胺在酸性条件下生成红 色偶氮化合物 其反应如下： 酶活性可用单位鲜重组织在单位时间内产生的亚硝酸量来表示： 亚硝酸态氮微克数/克鲜重组织 1 小时。 三、实验材料、仪器和试剂 1．实验材料 植物的根、茎、叶，本实验选用白萝卜叶片 2．仪器 （1）分光光度计（2）离心机（3）真空泵和真空干燥器 （4）恒温水浴锅（5）恒温箱（6）刻度吸管（lml、2ml、5ml） （7）试管 （8）天平 （9）三角瓶（50ml） 3．试剂 （1） 亚硝酸钠标准液：称取 0.1000g 亚硝酸钠（AR），用蒸馏水溶解并定容