机或有机载体反应，形成共价键将细胞固定。用该法制备的固定化细胞一般为死细 胞。 三、交联法 利用双功能或多功能试剂与细胞表面的反应基团（如氨基、羧基、羟基、巯基、 咪唑基）反应，从而使细胞固定。常用的交联剂包括：戊二醛、甲苯二异氰酸酯、 双重氮联苯胺。 由于交联试剂的毒性，这一方法具有一定的局限性。 四、包埋法 包埋法是细胞固定化最常用的方法。包埋法可以分为： 1，微胶囊法：利用半透性聚合物薄膜将细胞包裹起来，形成微型胶囊； 2，凝胶包埋法：是在无菌条件下，将生物细胞和胶溶液混合在一起，然后再经 过相应的造粒处理，形成直径为 1-4mm 的胶粒。 常用的包埋剂为：聚丙烯酰胺、琼脂、海藻酸、卡拉胶、二醋酸纤维、三醋酸 纤维、明胶等。 五、固定化方法的比较 吸附法：条件温和、方法简便、载体可再生。但操作稳定性差。 共价法：操作稳定性高。但由于试剂的毒性，易引起细胞的破坏。 交联法：可得到高细胞浓度，但机械强度低，无法再生，不适于实际应用。 包埋法：细胞和载体间没有束缚，固定化后，细胞仍保持较高活力。但这类方 法只适用于小分子底物。 第三节固定化细胞的形状及性质 一、形状 固定化细胞由于其用途和制备方法不同，可以是颗粒状、块状、条状、薄膜状 或不规则状等。但目前大多数制备成颗粒状珠体。 二、性质 1，最适 pH 细胞经固定化后，其最适 pH 因固定化方法不同而有一些调整。如，用聚丙烯 酰胺包埋的大肠杆菌中的天门冬氨酸酶和产氨短杆菌中的延胡索酸酶的最适 pH 向