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技术要点: 1).分离纯化嗜中性粒细胞时,要仔细认真保证细胞活力。 2)每次做实验均要设阴性对照,用真核细胞转染上清做趋 化实验时,要设空载体转染上清做阴性对照。 3).向趋化小室下孔中加样品时,上样量要适中,使之能形 成稍微隆起的液面,既能防止气泡形成,又可以防止样 品发生交叉污染 4).每个样品要做三个复孔。 5).放膜时要对准位置,过多调整位置,易发生交叉污染。 6).洗膜时注意,不要把细胞面与非细胞面弄反。 7).不同趋化因子的趋化谱不同,用不同细胞做趋化反时, 应选用不同孔径的滤膜、不同的细胞浓度和不同的趋 化时间。 8)做实验前要把小室洗净、晾干。技术要点: 1).分离纯化嗜中性粒细胞时,要仔细认真保证细胞活力。 2).每次做实验均要设阴性对照,用真核细胞转染上清做趋 化实验时,要设空载体转染上清做阴性对照。 3).向趋化小室下孔中加样品时,上样量要适中,使之能形 成稍微隆起的液面,既能防止气泡形成,又可以防止样 品发生交叉污染 4).每个样品要做三个复孔。 5).放膜时要对准位置,过多调整位置,易发生交叉污染。 6).洗膜时注意,不要把细胞面与非细胞面弄反。 7).不同趋化因子的趋化谱不同,用不同细胞做趋化反时, 应选用不同孔径的滤膜、不同的细胞浓度和不同的趋 化时间。 8).做实验前要把小室洗净、 晾干
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