CRISPR/cas9技术 学号:18301050186姓名:李仕毅 近年来, CRISPR/cas9技术正不断地被研究、发展及应用,毫无疑问是生物界的一大新 星。本篇报告将简单对 CRISPR/cas9技术进行介绍,解释为何称这种技术为“生命的福音” 并对其进行一些伦理方面的探讨。 一技术简介 CRISPR/Cas9是最新出现的一种由RNA指导的,利用cas9核酸酶对靶向基因进行编辑 的技术。它是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御,可用来对抗入侵 的病毒及外源DNA。(基本过程如右图) 原理:此系统的工作原理是 ceRNA(CR| SPR-derived rnA) 通过碱基配对与 tracrRNA( trans-activating RNA)结合形 成 tracrRNA/crRNA复合物,此复合物引导核酸酶Cas9蛋 白再与 ceRNA配对的序列靶位点剪切双链DNA。而通过人 工设计这两种RNA,可以改造形成具有引导作用的 SgRNA ( single- guide RNA),足以引导Cas9对DNA的定点切 割。作为一种RNA导向的 dsDNA结合蛋白,Cas9效应物核酸酶是已知的第一个统一 因子( unifying factor),能够共定位RNA、DNA和蛋白,从而拥有巨大的改造潜力。将 蛋白与无核酸酶的cas9(cas9 nuclease-nul)融合,并表达适当的 SgRNA,可靶定任 何 dSDNA序列,而 SgRNA的末端可连接到目标DNA,不影响Cas9的结合。因此, Cas9能在任何 dSDNA序列处带来任何融合蛋白及RNA,这为生物体的研究和改造带来 巨大潜力 CRISPR RNA 8a89p%I dabasu Famity database Famdy CRISPR-DR5T Seconde taken from the F database FarmilyCRISPR/cas9 技术 学号：18301050186 姓名：李仕毅 近年来，CRISPR/cas9 技术正不断地被研究、发展及应用，毫无疑问是生物界的一大新 星。本篇报告将简单对 CRISPR/cas9 技术进行介绍，解释为何称这种技术为“生命的福音”， 并对其进行一些伦理方面的探讨。 一.技术简介 CRISPR/Cas9 是最新出现的一种由 RNA 指导的，利用 cas9 核酸酶对靶向基因进行编辑 的技术。它是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御，可用来对抗入侵 的病毒及外源 DNA。（基本过程如右图） 原理：此系统的工作原理是 crRNA（ CRISPR-derived RNA ） 通过碱基配对与 tracrRNA （trans-activating RNA ）结合形 成 tracrRNA/crRNA 复合物，此复合物引导核酸酶 Cas9 蛋 白再与 crRNA 配对的序列靶位点剪切双链 DNA。而通过人 工设计这两种 RNA，可以改造形成具有引导作用的 sgRNA （single-guide RNA ），足以引导 Cas9 对 DNA 的定点切 割。作为一种 RNA 导向的 dsDNA 结合蛋白，Cas9 效应物核酸酶是已知的第一个统一 因子（unifying factor），能够共定位 RNA、DNA 和蛋白，从而拥有巨大的改造潜力。将 蛋白与无核酸酶的 Cas9（ Cas9 nuclease-null）融合，并表达适当的 sgRNA ，可靶定任 何 dsDNA 序列，而 sgRNA 的末端可连接到目标 DNA，不影响 Cas9 的结合。因此， Cas9 能在任何 dsDNA 序列处带来任何融合蛋白及 RNA，这为生物体的研究和改造带来 巨大潜力