1.大黄总蒽醌苷元的提取 大黄粗粉(100g) 加20%H2SO4水溶液200ml,氯仿500ml, 水浴回流4hr,过滤,测量滤液体积 残渣 氯仿提取液(约450ml) 注意:①大黄中的蒽醌类成分大部分与糖结合,以蒽醌的形式存在于植物组织 中。所以要用酸水解使其生成苷元。蒽醌苷元可溶于氯仿、苯及乙醚等有机溶剂, 用苯时应注意苯蒸气的挥发,严防中毒;②所得的氯仿液中如带有酸水液,应该用 分液漏斗分出弃去,并用蒸馏水回洗一次除去酸性以免影响梯度萃取。氯仿提取液 放置中如有沉淀析出,可滤取之,该沉淀多为大黄素,余液进行下一步分离试验用。 2.总蒽醌苷元分离方案的设计 ①大黄总蒽醌苷元的纸色谱 ②蒽醌类成分的缓冲纸色谱试验 ③最佳萃取剂及其用量的确定 各种萃取剂用量的确定 新分离方法的设计 蒽醌类成分的分离与精制 大黄酸的分离与精制 将含有总游离蒽醌的氯仿液450ml移至1000ml的大分液漏斗中,加PH8缓冲液 275ml振摇萃取,静置至彻底分层,放出氯仿液后,到出碱水液至置250ml烧杯中, 加HC酸化至PH=3,待黄色沉淀析岀完全后,过滤、干燥,干燥后的样品加冰醋酸 loml加热使溶,趁热过滤,滤液静置,析出黄色针晶为大黄酸,过滤即得纯品。 大黄素的分离与精制 将提过大黄酸的氯仿液继续移至分液漏斗中,用PH9.9缓冲液275m振摇萃取, 彻底分层后,分出碱水层,并用HCl酸化至PH=3,析出棕黄色沉淀,过滤,沉淀经 干燥后,用10ml冰醋酸加热使溶,趁热过滤,析出橙色大针晶,过滤后,即得大黄 素纯品 芦荟大黄素的分离和精制 余下氯仿液移至分液漏斗后,加5%NaCO3:5%NaOH(9:1)碱水液540ml或用 0.5%KOH540ml振摇萃取,碱水液加HCl酸化,析出的沉淀过滤干燥,用10ml乙酸 乙酯重结晶,得黄色针晶的芦荟大黄素纯品。 ④大黄酚和大黄素甲醚的分离——磷酸氢钙柱色谱 蒽醌类成分的鉴定1．大黄总蒽醌苷元的提取 大黄粗粉（100g） 加20%H2 SO4水溶液200ml，氯仿500ml， 水浴回流4hr，过滤，测量滤液体积。 残渣 氯仿提取液（约450ml） 注意：①大黄中的蒽醌类成分大部分与糖结合，以蒽醌的形式存在于植物组织 中。所以要用酸水解使其生成苷元。蒽醌苷元可溶于氯仿、苯及乙醚等有机溶剂， 用苯时应注意苯蒸气的挥发，严防中毒；②所得的氯仿液中如带有酸水液，应该用 分液漏斗分出弃去，并用蒸馏水回洗一次除去酸性以免影响梯度萃取。氯仿提取液 放置中如有沉淀析出，可滤取之，该沉淀多为大黄素，余液进行下一步分离试验用。 2．总蒽醌苷元分离方案的设计 ① 大黄总蒽醌苷元的纸色谱 ② 蒽醌类成分的缓冲纸色谱试验 ③ 最佳萃取剂及其用量的确定 各种萃取剂用量的确定 新分离方法的设计 蒽醌类成分的分离与精制 大黄酸的分离与精制 将含有总游离蒽醌的氯仿液450ml移至1000ml的大分液漏斗中，加PH8缓冲液 275ml振摇萃取，静置至彻底分层，放出氯仿液后，到出碱水液至置250ml烧杯中， 加HCl酸化至PH=3，待黄色沉淀析出完全后，过滤、干燥，干燥后的样品加冰醋酸 10ml加热使溶，趁热过滤，滤液静置，析出黄色针晶为大黄酸，过滤即得纯品。 大黄素的分离与精制 将提过大黄酸的氯仿液继续移至分液漏斗中，用PH9.9缓冲液275ml振摇萃取， 彻底分层后，分出碱水层，并用HCl酸化至PH=3，析出棕黄色沉淀，过滤，沉淀经 干燥后，用10ml冰醋酸加热使溶，趁热过滤，析出橙色大针晶，过滤后，即得大黄 素纯品。 芦荟大黄素的分离和精制 余下氯仿液移至分液漏斗后，加5%NaCO3:5%NaOH (9:1) 碱水液540ml或用 0.5%KOH540ml振摇萃取，碱水液加HCl酸化，析出的沉淀过滤干燥，用10ml乙酸 乙酯重结晶，得黄色针晶的芦荟大黄素纯品。 ④ 大黄酚和大黄素甲醚的分离——磷酸氢钙柱色谱 蒽醌类成分的鉴定