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溶解曲线绘制与分析 SYBR Green染料没有序列特异性,可以结合到包括非特异产物和引物二聚 体在内的任何 dsDNA上。因此有必要区分目标信号和假信号。 在整个PCR完成后进行,从60°c升至95°C,每升高1°C仪器会自动收集荧 光信号,得到的熔解曲线是逐渐下降的过程,且在Tm值下降最快。为方便 分析,将温度与荧光强度的变化求导,即得到单峰的熔解曲线,就可以证明 引物的特异性良好,实验结果不受非特异性扩增和引物二聚体的千扰 内参 检测基因 0024 -0.004溶解曲线绘制与分析 SYBR Green 染料没有序列特异性,可以结合到包括非特异产物和引物二聚 体在内的任何 dsDNA 上。因此有必要区分目标信号和假信号。 在整个PCR完成后进行,从 60°C升至 95°C,每升高 1°C 仪器会自动收集荧 光信号,得到的熔解曲线是逐渐下降的过程,且在 Tm 值下降 最快。为方便 分析,将温度与荧光强度的变化求导,即得到单峰的熔解曲线,就可以证明 引物的特异性良好,实验结果不受非特异性扩增和引物二聚体的干扰。 内参 检测基因
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