(三)限制性片段长度多态性 随着对基因认识的不断深入,发现在同种生物的不同个体之间,尽管其蛋白质产 物的结构和功能完全相同或仅存在着细微的差异,但在DNA水平却存在着差异, 尤其在不编码蛋白质的区域以及没有重要调节功能的区域表现更为突出。这种不 影响生物体表型的DNA突变被称为中性突变。 分子生物学技术的不断发展已使得从DNA水平直接分析这类突变成为可能。 目前应用较多且成熟的方法是限制性片段长度多态性( Restriction fragment length polymorphism,RFLP)。即当DNA序列中某一个碱基发生突变,使突变所在部位 的DNA序列获得或丢失某种限制性核酸内切酶位点;或当DNA分子内部发生 较大的顺序突变如缺失、重复、插入,或DNA高变区内某串联重复顺序的拷贝 数不同致使其两侧限制性核酸内切酶位点发生相对位移时,利用相应的限制性核 酸内切酶消化此DNA,便会产生与正常不同的限制性片段。这样,在同种生物 的不同个体中就会出现不同长度的限制性片段类型 因为DNA的中性突变常以孟德尔显性遗传方式遗传给下一代,所以对这类突变 检测已广泛用于遗传病的诊断、产前诊断、亲子鉴定以及法医学上对罪犯的确认 等 (四)DNA序列分析 NA sequencing) DNA的一级结构决定了基因的功能,欲想解释基因的生物学含义,首先必须知 道其DNA顺序。因此DNA序列分析是分子遗传学中一项既重要又基本的课题 1986年由美国学者提出的,目前正在实施的人类基因组计划 human genome project),则是要通过对人类基因组3×10%bp全序列的序列分析和人类基因的染色 体图谱制定达到了解其结构,认识其功能,即从分子遗传学水平来认识人类自身 的结构和功能特征的目的。 核酸的核苷酸序列测定方法已经过近20年的发展,因而测序的具体方法五花八 门、种类繁多。但是究其所依据的基本原理,不外乎 Sanger的核酸链合成终止(三)限制性片段长度多态性 随着对基因认识的不断深入，发现在同种生物的不同个体之间，尽管其蛋白质产 物的结构和功能完全相同或仅存在着细微的差异，但在 DNA 水平却存在着差异， 尤其在不编码蛋白质的区域以及没有重要调节功能的区域表现更为突出。这种不 影响生物体表型的 DNA 突变被称为中性突变。 分子生物学技术的不断发展已使得从 DNA 水平直接分析这类突变成为可能。 目前应用较多且成熟的方法是限制性片段长度多态性(Restriction fragment length polymorphism,RFLP)。即当 DNA 序列中某一个碱基发生突变，使突变所在部位 的 DNA 序列获得或丢失某种限制性核酸内切酶位点；或当 DNA 分子内部发生 较大的顺序突变如缺失、重复、插入，或 DNA 高变区内某串联重复顺序的拷贝 数不同致使其两侧限制性核酸内切酶位点发生相对位移时，利用相应的限制性核 酸内切酶消化此 DNA，便会产生与正常不同的限制性片段。这样，在同种生物 的不同个体中就会出现不同长度的限制性片段类型。 因为 DNA 的中性突变常以孟德尔显性遗传方式遗传给下一代，所以对这类突变 检测已广泛用于遗传病的诊断、产前诊断、亲子鉴定以及法医学上对罪犯的确认 等。 (四)DNA 序列分析(DNA sequencing) DNA 的一级结构决定了基因的功能，欲想解释基因的生物学含义，首先必须知 道其 DNA 顺序。因此 DNA 序列分析是分子遗传学中一项既重要又基本的课题。 1986 年由美国学者提出的，目前正在实施的人类基因组计划(human genome project)，则是要通过对人类基因组 3×109bp 全序列的序列分析和人类基因的染色 体图谱制定达到了解其结构，认识其功能，即从分子遗传学水平来认识人类自身 的结构和功能特征的目的。 核酸的核苷酸序列测定方法已经过近 20 年的发展，因而测序的具体方法五花八 门、种类繁多。但是究其所依据的基本原理，不外乎 Sanger 的核酸链合成终止