发生风险。为了探讨人 iPSCs的致瘤倾向,科学家对49个人类 iPSCs细胞系和10个人的 ESCs细胞系的基因表达和DNA甲基化进行了研究,发现7个 iPSCs克隆保留大量未分化 细胞,甚至在神经分化培养和移植到小鼠脑内后形成畸胎瘤,这些有缺陷的分化细胞系中几 种基因呈现高水平的基因表达,这些包括人类内源性逆转录病毒长末端重复序列,人iPSC 在神经分化过程中有异常的基因表达和缺陷潜能。 3.1.2诱导效率低及投入成本高 虽然诱导多能干细胞的重编程的技术有所突破,但是诱导效率太低是目前 iPSCs应用于 临床必须跨越的一大障碍。虽然iPSC集落形成的效率随供体的不同而有所不同,但基础因 子的内源性表达与细胞重编程效率呈正相关。有基础内源性因子表达的供体细胞形成iPSC 克隆的平均效率为0.49±0.10%,一般转导效率在0.31-0.66%,新生儿皮肤成纤维细胞平 均转导效率为0.03±0%,形成iPSC克隆的平均效率为0.02~0.03%。此外,当多个样本 需要重新编程时, i PScs衍生的高成本是限制大多数实验室发展的一个主要因素。而且, 诸多广泛应用的整合方法中,仙台病毒和mRNA的方法需要昂贵的试剂进行重编程,而 eplsoma方法需要大量的起始细胞,则需要投入高成本劳动力。重编程效率的提高可以有多 种方法,包括不同诱导因子的特异性组合、 mirnas、下调抑制因子、上调/抑制一些与细 胞增殖相关的信号通路等。 目前,虽然iPSC技术发展迅猛,但是该领域的临床研究才起步不久,iPSC的临床应 用仍受到以下几个方面的限制:(1)如何高效获得安全的、高纯度的iPSC:(2)如何定 向诱导多能干细胞向某一特定类型的细胞分化并能在新的组织环境中承担成熟细胞的功能 (3)iPSC在临床治疗上的有效性和安全性还需继续观察:(4)如何进一步制定临床应用 上的标准和规范以及临床毒理和药理的分析方法和指标等。阿 四、参考文献 []iPs技术的发展与应用张哲源 [以]诱导多能干细胞在医学方面的应用董明清、邢书娟、梁晓庆、周宝珍、张敏利现代生物医学进展 Progress in Modern Biomedicine2019年13期 [3J0kita K, Yamanaka S. Induced pluripotent stem cells: op- portunities and challenges. Philos Trans R Soc Lond b biol sci, 2011, 366 2198 220 [4]诱导多能性干细胞重编程方法及应用研究进展卢电、谢英俊、孙筱放实用医学杂志 The Journal of Practical Medicine2019年11期 [5]诱导多能干细胞的研究现状及展望褚海涛、李晓蕾、贾心善中国组织工程研究 Chinese Journal of Tissue engineering Research June 4, 2013 Vol. 17, No 23发生风险。为了探讨人 iPSCs 的致瘤倾向，科学家对 49 个人类 iPSCs 细胞系和 10 个人的 ESCs 细胞系的基因表达和 DNA 甲基化进行了研究，发现 7 个 iPSCs 克隆保留大量未分化 细胞，甚至在神经分化培养和移植到小鼠脑内后形成畸胎瘤，这些有缺陷的分化细胞系中几 种基因呈现高水平的基因表达，这些包括人类内源性逆转录病毒长末端重复序列，人 iPSC 在神经分化过程中有异常的基因表达和缺陷潜能。 3.1.2 诱导效率低及投入成本高[2] 虽然诱导多能干细胞的重编程的技术有所突破，但是诱导效率太低是目前 iPSCs 应用于 临床必须跨越的一大障碍。虽然 iPSC 集落形成的效率随供体的不同而有所不同，但基础因 子的内源性表达与细胞重编程效率呈正相关。有基础内源性因子表达的供体细胞形成 iPSC 克隆的平均效率为 0.49±0.10%，一般转导效率在 0.31- 0.66%，新生儿皮肤成纤维细胞平 均转导效率为 0.03±0%，形成 iPSC 克隆的平均效率为 0.02～0.03%。此外，当多个样本 需要重新编程时，iPSCs 衍生的高成本是限制大多数实验室发展的一个主要因素。而且，在 诸多广泛应用的整合方法中，仙台病毒和 mRNA 的方法需要昂贵的试剂进行重编程，而 episoma 方法需要大量的起始细胞，则需要投入高成本劳动力。重编程效率的提高可以有多 种方法，包括不同诱导因子的特异性组合、miRNAs、下调抑制因子、上调 / 抑制一些与细 胞增殖相关的信号通路等。 目前，虽然 iPSC 技术发展迅猛，但是该领域的临床研究才起步不久，iPSC 的临床应 用仍受到以下几个方面的限制：（1）如何高效获得安全的、高纯度的 iPSC；（2）如何定 向诱导多能干细胞向某一特定类型的细胞分化并能在新的组织环境中承担成熟细胞的功能； （3）iPSC 在临床治疗上的有效性和安全性还需继续观察；（4）如何进一步制定临床应用 上的标准和规范以及临床毒理和药理的分析方法和指标等。[4] 四、参考文献 [1] iPS 技术的发展与应用 张哲源 [2]诱导多能干细胞在医学方面的应用 董明清、邢书娟、梁晓庆、周宝珍、张敏利 现代生物医学进展 Progress in Modern Biomedicine 2019 年 13 期 [3]Okita K，Yamanaka S． Induced pluripotent stem cells: op- portunities and challenges． Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci，2011，366 2198 ～ 2207． [4]诱导多能性干细胞重编程方法及应用研究进展 卢电、谢英俊、孙筱放 实用医学杂志 The Journal of Practical Medicine 2019 年 11 期 [5]诱导多能干细胞的研究现状及展望 褚海涛、李晓蕾、贾心善 中国组织工程研究 Chinese Journal of Tissue Engineering Research June 4,2013 Vol.17,No.23