将Giemsa粉溶于少许甲醇中，用研体充分研磨至无颗粒为止，加入全 部甲醇混匀后，加甘油125ml,混匀后放入棕色瓶，置于37℃温箱保存（原 液)。使用前，吸取10mlDH6.8的磷酸盐缓冲液，加入Giemsa原液1ml, 混匀，即配成Giemsa使用液。 6.0.075mol/LKC1低渗液 称取2.79gKC1溶于500ml蒸馏水中，待溶后置于37C温箱保存备用 (三)细菌培养、质粒提取、转化常用试剂 1.LB培养基：将下列组分溶解在0.9L水中： 蛋白陈 10g 酵母提取物 5g 氯化钠 10g 如果需要用1 N NaOH(~1ml)调整pH至7.0，再补足水至1L。注：琼 脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。 2.染料：lOmg/ml的溴化乙啶(ethidium bromide): 小心称取1g溴化乙锭，转移到广口瓶中，加100m1水，用磁力搅拌器 搅拌直到完全溶解。用铝箔包裹装液管，于4℃贮存。 3.2.5%X-gal(5-溴-4-氯-3-吲1哚-B-半乳糖苷)： 溶解25mg的X-gal于1ml的二甲基甲酰胺(DMF),用铝箔包裹装液管， 贮存于-20℃。 4.1mol/LCaC12溶液 在200ml蒸馏水中溶解54 g CaCiz·620,用0.22μm滤器过滤除菌， 分装成10ml小份贮存于-20℃。 5.TE(用于悬浮和贮存DNA) 成分及终浓度 配制100ml溶液各成分的用量 10mmol/L Tris-HCl 1ml 1mol/L Tris-HC1(pH7.4-8.0,25C) 1mmol/LEDTA 200ul 0.5 mol/L EDTA (pH 8.0) 98.8ml 附琼脂糖凝胶浓度与线性DNA分辨范围 凝胶浓度(%) 线性DNA长度(bp) 0.5 1000~30000将 Giemsa 粉溶于少许甲醇中，用研钵充分研磨至无颗粒为止，加入全 部甲醇混匀后，加甘油 125ml，混匀后放入棕色瓶，置于 37℃温箱保存（原 液）。使用前，吸取 10ml pH6.8 的磷酸盐缓冲液，加入 Giemsa 原液 1ml， 混匀，即配成 Giemsa 使用液。 6．0.075mol/L KCl 低渗液 称取 2.79g KCl 溶于 500ml 蒸馏水中，待溶后置于 37℃温箱保存备用。 （三）细菌培养、质粒提取、转化常用试剂 1. LB 培养基：将下列组分溶解在 0.9L 水中： 蛋白胨 10g 酵母提取物 5g 氯化钠 10g 如果需要用 1N NaOH（～1ml）调整 pH 至 7.0，再补足水至 1L。注：琼 脂平板需添加琼脂粉 12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉 7g/L。 2. 染料：10mg/ml 的溴化乙啶（ethidium bromide）： 小心称取 1g 溴化乙锭，转移到广口瓶中，加 100ml 水，用磁力搅拌器 搅拌直到完全溶解。用铝箔包裹装液管，于 4℃贮存。 3. 2.5％ X－gal（5-溴-4-氯-3-吲哚－β-半乳糖苷）： 溶解 25mg 的 X－gal 于 1ml 的二甲基甲酰胺（DMF）,用铝箔包裹装液管， 贮存于-20℃。 4. 1mol/L CaCl2 溶液 在 200ml 蒸馏水中溶解 54g CaCl2·6H2O，用 0.22μm 滤器过滤除菌， 分装成 10ml 小份贮存于-20℃。 5. TE（用于悬浮和贮存 DNA） 附 琼脂糖凝胶浓度与线性 DNA 分辨范围 成分及终浓度 配制 100ml 溶液各成分的用量 10mmol/L Tris－HCl 1mmol/L EDTA 水 1ml 1mol/L Tris-HCl（pH7.4-8.0，25℃） 200ul 0.5 mol/L EDTA（pH 8.0） 98.8ml 凝胶浓度（%） 线性 DNA 长度（bp） 0.5 1000～30000