穿过,保留时间短;而小分子恰恰相反,保留时间较长)而得以分离(如上图所 示) 九、疏水作用层析( Hydrophobic Interaction Chromatography,HC) 原理:依据生物大分子疏水性差异实现分离 由于不同蛋白质分子氨基酸组成差异,其疏水性也不尽相同,HC技术是基 于生物大分孑的疏水性差异而实现分离的该方法弥补了HPLC难以用于蛋白质 等生物大分子的分离的不足。具体方法是 在高盐环境下,蛋白质表面的疏水区域暴露,固定相表面修饰了一些疏水的 基团,这样蛋白质的疏水部分即可与固定相发生较强的疏水相互作用,从而被结 合在固定相表面,而一旦降低流动相的盐浓度即可实现蛋白质的洗脱(见下图), 方便易行,是蛋白质分离的常用手段之 Fugure 4 eshonuem of Migdrophobie tnteroeaton Chromatography High solt concentration Low salt concentration 十、亲和色谱( Affinity chromatography穿过，保留时间短；而小分子恰恰相反，保留时间较长）而得以分离（如上图所 示） 九、疏水作用层析（Hydrophobic Interaction Chromatography, HIC） 1、原理：依据生物大分子疏水性差异实现分离 由于不同蛋白质分子氨基酸组成差异，其疏水性也不尽相同，HIC 技术是基 于生物大分子的疏水性差异而实现分离的，该方法弥补了 HPLC 难以用于蛋白质 等生物大分子的分离的不足。具体方法是： 在高盐环境下，蛋白质表面的疏水区域暴露，固定相表面修饰了一些疏水的 基团，这样蛋白质的疏水部分即可与固定相发生较强的疏水相互作用，从而被结 合在固定相表面，而一旦降低流动相的盐浓度即可实现蛋白质的洗脱（见下图）， 方便易行，是蛋白质分离的常用手段之一。 十、亲和色谱（Affinity chromatography） A 28 0 0. 04 A U