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在对PCR产物进行电泳检测时,有时会出现拖带或非特异性 扩增条带,请分析其原因?如果检测结果是看不到DNA带或 DNA带很弱,那又是为什么? PCR扩增有时出现拖带或非特异性扩增条带。其原因往往由 于酶量过多或酶的质量差,模板中杂质过多,dNTP浓度过 高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多等引起 。如果检测结果看不到DNA带或DNA带很弱可能是:①模 板中含有杂质;②酶失活;③引物质量不好;④Mg2+浓度 过低;⑤反应体积的改变等等;⑥其他的一些物理原因,如 复性温度低,变性时间短等或者也可能是由于靶序列的变异 等。 在对 PCR 产物进行电泳检测时,有时会出现拖带或非特异性 扩增条带,请分析其原因?如果检测结果是看不到 DNA 带或 DNA 带很弱,那又是为什么? PCR 扩增有时出现拖带或非特异性扩增条带。其原因往往由 于酶量过多或酶的质量差,模板中杂质过多, dNTP 浓度过 高, Mg2+ 浓度过高,退火温度过低,循环次数过多等引起 。如果检测结果看不到 DNA 带或 DNA 带很弱可能是:①模 板中含有杂质;②酶失活;③引物质量不好;④ Mg2+ 浓度 过低;⑤反应体积的改变等等;⑥其他的一些物理原因,如 复性温度低,变性时间短等或者也可能是由于靶序列的变异 等
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