(一)目的与要求 1掌握：目的基因的获取方法： 2熟悉：重组DNA技术的概念和基本步骤！ 3.了解：工具酶、DNA重组载体。 仁)教学内容 L.工具酶包括限制性内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、T4多核苷酸激、减性磷酸酶等。 2.DN八重组载体包括质粒载体、噬菌体载体、真核细胞的克隆载体及人工染色体。 3.DNA重组与鉴定包括DNA重组和重组子的筛选与鉴定， 4.外源基因的蛋白表达包括原核表达体系和真核表达体系，表达产物的分离纯化与鉴定。 (三)重点和难点 1教学重点：限制性内切酶和运载体的作用。 2.教学难点：提取目的基因的方法和目的基因导入受体细胞的途径。 第七章聚合酶链式反应及其在基因诊断中的应用 (一)目的与要求 I掌握：PCR的概念及影响PCR反应的因素，RT-PCR、荧光定量PCR的概念及定量的依据： 2.熟悉：PCR行生技术的概念及意义，熟恶PCR产物的检测方法，熟悉PCR引物设计原则和方法，定量PCR检 测的临床价值定量以及PCR中产生荧光的机制； 3.了解：分子荧光的有关概念，临床基因扩增检验技术。 (二教学内容 1,聚合酶链式反应包括原理及反应过程、反应体系及反应条件和PCR质量控制。 2.PCR产物的检测、PCR-限制性片段长度多态性、等位基因特异性寡聚核苷酸和单链构象多态性、变性梯度 疑胶电泳和融点曲线分析PCR产物的序列分析. 3.PCR技术在分子诊断中的应用. (三)重点和难点 L.教学重点：PCR反应的影响因素，荧光定量PCR的概念及定量依据。 2.教学难点：荧光定量PCR的定量依据。 第八章核酸分子杂交技术与应用 (一)目的与要求(一)目的与要求 1.掌握：目的基因的获取方法； 2.熟悉：重组DNA技术的概念和基本步骤； 3.了解：工具酶、DNA重组载体。 (二)教学内容 1. 工具酶包括限制性内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、T4多核苷酸激酶、碱性磷酸酶等。 2. DNA重组载体包括质粒载体、噬菌体载体、真核细胞的克隆载体及人工染色体。 3. DNA重组与鉴定包括DNA重组和重组子的筛选与鉴定。 4. 外源基因的蛋白表达包括原核表达体系和真核表达体系，表达产物的分离纯化与鉴定。 (三)重点和难点 1.教学重点：限制性内切酶和运载体的作用。 2.教学难点：提取目的基因的方法和目的基因导入受体细胞的途径。 第七章聚合酶链式反应及其在基因诊断中的应用 (一)目的与要求 1.掌握：PCR的概念及影响PCR反应的因素，RT-PCR、荧光定量PCR的概念及定量的依据； 2.熟悉：PCR衍生技术的概念及意义，熟悉PCR产物的检测方法，熟悉PCR引物设计原则和方法，定量PCR检 测的临床价值定量以及PCR中产生荧光的机制； 3.了解：分子荧光的有关概念，临床基因扩增检验技术。 (二)教学内容 1. 聚合酶链式反应包括原理及反应过程、反应体系及反应条件和PCR质量控制。 2. PCR产物的检测、PCR-限制性片段长度多态性、等位基因特异性寡聚核苷酸和单链构象多态性、变性梯度 凝胶电泳和融点曲线分析PCR产物的序列分析。 3. PCR技术在分子诊断中的应用。 (三)重点和难点 1.教学重点：PCR反应的影响因素，荧光定量PCR的概念及定量依据。 2.教学难点：荧光定量PCR的定量依据。 第八章 核酸分子杂交技术与应用 (一)目的与要求