Sir2位于酵母第4条 染色体的左臂上,全长 4649hp,编码一个562 个氨基酸的蛋白质,编 码区的前端有一段前导 序列(SL)。其cDNA 序列由2393个碱基组 成,含有一个开放阅读 框架,一个5′端非翻译 区和一个3'端非翻译 0o.。 a 区 Sir2的N端结构域(94~198aa)和C端结构域(199~562aa)对于Sir2发挥基 因转录沉默功能具有举足轻重的作用。N端结构域内具有对Sir2/3/4复合物定点结 合于rDNA的重复序列区域而使基因转录沉默。C端结构域是Sir2发挥基因转录沉默 的功能性区域之 通过x线晶体衍射方法发现Sir2与其同源蛋白有极其相似的分子结构,都含有两个 高度保守序列和由4个高度保守的半胱氨酸形成的“锌指”结构,研究发现,Sir2的同 源蛋白Sir2-An由9个阿尔法螺旋结构和8个贝塔片层交叉排列形成两个功能性结构 域,一个功能性结构域是具有“锌指”结构典型保守序列的锌离子结合位点。另一个功 能性结构域是由NAD的腺嘌呤-核糖、烟酰胺-核糖和深部的NAD非直接结合位点三 部分组成的NAD结合位点。高度保守位点的氨基酸的突变,使Sir2依赖NAD的组蛋 白去乙酰化酶活性显著降低。 四、Sir2与细胞衰老 酵母细胞的核仁由100~200个串联重复的5s核糖体亚基的基因rDNA拷贝组成, 当酵母菌细胞经历多次分裂之后,会将多余的rDNA序列以ERC的形式凸出于染色体 上。这些ERC是在细胞分裂前与母细胞染色体一起复制的,而在细胞分裂之后,ERC 就一直存在于母细胞内不断积累,当其达到一定数目之后,他们会阻塞细胞核,妨碍 细胞对其基因的阅读和复制,致使细胞停止分裂并最终导致母细胞的死亡,而Sir2可 以抑制同源重组以防止产生ERC。 Sir2的独特性在于其酶活性是依赖于一种普遍存在的小分子NAD。NAD长久以来被 认为是细胞中许多代谢反应的反应渠道,Sir2与它之间的这种联系把Sir2的活性与代 谢作用联系起来,这就有可能把在热量限制研究中观察到的饮食与衰老的关联性与 sir2的活性联系起来。大量实验证明,细胞中只有存在NAD时,Sir2才能使染色质2 Sir2 的 N 端结构域（94～198aa）和 C 端结构域（199～562aa）对于 Sir2 发挥基 因转录沉默功能具有举足轻重的作用。N 端结构域内具有对 Sir2／3/4 复合物定点结 合于 rDNA 的重复序列区域而使基因转录沉默。C 端结构域是 Sir2 发挥基因转录沉默 的功能性区域之一。 通过 x 线晶体衍射方法发现 Sir2 与其同源蛋白有极其相似的分子结构，都含有两个 高度保守序列和由 4 个高度保守的半胱氨酸形成的“锌指”结构，研究发现，Sir2 的同 源蛋白 Sir2-Afl 由 9 个阿尔法螺旋结构和 8 个贝塔片层交叉排列形成两个功能性结构 域，一个功能性结构域是具有“锌指”结构典型保守序列的锌离子结合位点。另一个功 能性结构域是由 NAD 的腺嘌呤-核糖、烟酰胺-核糖和深部的 NAD 非直接结合位点三 部分组成的 NAD 结合位点。高度保守位点的氨基酸的突变，使 Sir2 依赖 NAD 的组蛋 白去乙酰化酶活性显著降低。 四、Sir2 与细胞衰老 酵母细胞的核仁由 100～200 个串联重复的 5s 核糖体亚基的基因 rDNA 拷贝组成， 当酵母菌细胞经历多次分裂之后，会将多余的 rDNA 序列以 ERC 的形式凸出于染色体 上。这些 ERC 是在细胞分裂前与母细胞染色体一起复制的，而在细胞分裂之后，ERC 就一直存在于母细胞内不断积累，当其达到一定数目之后，他们会阻塞细胞核，妨碍 细胞对其基因的阅读和复制，致使细胞停止分裂并最终导致母细胞的死亡，而 Sir2 可 以抑制同源重组以防止产生 ERC。 Sir2 的独特性在于其酶活性是依赖于一种普遍存在的小分子 NAD。NAD 长久以来被 认为是细胞中许多代谢反应的反应渠道，Sir2 与它之间的这种联系把 Sir2 的活性与代 谢作用联系起来，这就有可能把在热量限制研究中观察到的饮食与衰老的关联性与 Sir2 的活性联系起来。大量实验证明，细胞中只有存在 NAD 时，Sir2 才能使染色质 Sir2 位于酵母第 4 条 染色体的左臂上，全长 4649hp，编码一个 562 个氨基酸的蛋白质，编 码区的前端有一段前导 序列（SL）。其 cDNA 序列由 2393 个碱基组 成，含有一个开放阅读 框架，一个 5‘端非翻译 区和一个 3’端非翻译 区