一、限制性内切核酸酶 限制性内切核酸酶的概念及其种类：·限制性内切核酸酶的命名和分类：限制性内切核 酸酶在生物技术中的应用 二、#DNA聚合酶 大肠杆菌DNA聚合酶：Tag DNA聚合酶：NA反转录醇：DNA连接酶，其他工具酶类。 三、#基因克隆需要的载体 幸基因克隆载体必须具备的基本条件：基因工程戟体的种类：质粒载体：噬菌体载体： 人工染色体载体。 第二节植物基因文库的构建 一、#植物基因文库的种类 基因组文库（概念、特点）：cDNA文库（概念、特点）：两类文库的比较。 二、#植物基因文库构建的基本过程 基因组文库构建的一般步骤：cNA文库构建的基本步骤 第三节#基因克隆的方法 一、以已知序列为基础的基因克隆方法 以氨基酸序列为基础的基因克降方法：以已知核苷酸序列为基础的的基因克降方法。 二、以分子标记连锁图谱为基础的基因克隆方 分子标记连 之：图谱克 隆方法的 一般要求及其基本过程 三、以人工突变体为基础基因克隆方法 转座子标签法：T-DNM标签法。 四、以表达差异为基出的基因克隆方法 文库扣除杂交法：mRNA差异显示法：抑制消减杂交法。 第五章植物转基因技术与方法 (4学时) 1、教学基本要求 (1)了解植物遗传转化的发展概况，掌握遗传转化的概念和特点 (2)了解各种遗传转化方法的基本原理与技术特点，掌握农杆菌介导转化 方法。 (3)了解鉴定转基因植物的基本技术体系，理解外源基因在转基因植物中 的整合方式和遗传特征。 2、教学基本内容 第一节植物遗传转化的概念与发展现状 一、植物遗传转化的概念和特点 ◆植物遗传转化的概念：植物遗传转化的特点 二、植物转基因研究的发展现状 转基因植物发展简史：转基因技术的发展。 第二节遗传转化方法和技术 5 一、限制性内切核酸酶 限制性内切核酸酶的概念及其种类；﹡限制性内切核酸酶的命名和分类；限制性内切核 酸酶在生物技术中的应用。 二、﹟DNA 聚合酶 大肠杆菌 DNA 聚合酶；Taq DNA 聚合酶；RNA 反转录酶；DNA 连接酶，其他工具酶类。 三、﹟基因克隆需要的载体 ﹡基因克隆载体必须具备的基本条件；基因工程载体的种类；质粒载体；噬菌体载体； 人工染色体载体。 第二节 植物基因文库的构建 一、﹟植物基因文库的种类 基因组文库（概念、特点）；cDNA 文库（概念、特点）；两类文库的比较。 二、﹟植物基因文库构建的基本过程 基因组文库构建的一般步骤；cDNA 文库构建的基本步骤。 第三节 ﹟基因克隆的方法 一、以已知序列为基础的基因克隆方法 以氨基酸序列为基础的基因克隆方法；以已知核苷酸序列为基础的的基因克隆方法。 二、以分子标记连锁图谱为基础的基因克隆方法 分子标记连锁图谱的概念；图谱克隆方法的一般要求及其基本过程。 三、以人工突变体为基础基因克隆方法 转座子标签法；T-DNA 标签法。 四、以表达差异为基出的基因克隆方法 文库扣除杂交法；mRNA 差异显示法；抑制消减杂交法。 第五章 植物转基因技术与方法 （4 学时） 1、教学基本要求 （1）了解植物遗传转化的发展概况，掌握遗传转化的概念和特点。 （2）了解各种遗传转化方法的基本原理与技术特点，掌握农杆菌介导转化 方法。 （3）了解鉴定转基因植物的基本技术体系，理解外源基因在转基因植物中 的整合方式和遗传特征。 2、教学基本内容 第一节 植物遗传转化的概念与发展现状 一、植物遗传转化的概念和特点 ﹡植物遗传转化的概念；植物遗传转化的特点。 二、植物转基因研究的发展现状 转基因植物发展简史；转基因技术的发展。 第二节 遗传转化方法和技术