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95%酒精5min 85%酒精5min 70%酒精5min 50%酒精5min 30%酒精5min 蒸馏水5-10mi 1mol/LH的染色缸内(清洗一下) 温浴至60℃的1mol/LHCI溶液中水解8min 取出标本,放入室温1 mol/L HO溶液 (注意:这个步骤非常重要,必须用1moL稀盐酸冲洗,因为它可以洗去贴在切片上的试剂的痕 迹。如用蒸馏水冲洗,则试剂本身也可以水解,所释放出的碱性品红,可以使切片内一切嗜碱性物 质皆染色从而引起严重的错误。若切片较厚,可延长其水解时间,而且每次均需更换洗涤剂) 蒸馏水冲洗3次(使水解停止) Sch试剂中染色40min 用亚硫酸水洗3~5次(以洗去多余的非特异性色素及扩散的染料) 流水冲洗5min 蒸馏水洗片刻 1%亮绿复染数秒钟 (注意:复染时间切忌过长,以免染色过深,影响对DNA的观察)10 ↓ 95%酒精 5min ↓ 85%酒精 5min ↓ 70%酒精 5min ↓ 50%酒精 5min ↓ 30%酒精 5min ↓ 蒸馏水 5-10min ↓ 1 mol/L HCl 的染色缸内(清洗一下) ↓ 温浴至 60℃的 1 mol/L HCl 溶液中水解 8 min ↓ 取出标本,放入室温 1 mol/L HCl 溶液 (注意: 这个步骤非常重要,必须用 1 mol/L 稀盐酸冲洗,因为它可以洗去贴在切片上的试剂的痕 迹。如用蒸馏水冲洗,则试剂本身也可以水解,所释放出的碱性品红,可以使切片内一切嗜碱性物 质皆染色从而引起严重的错误。若切片较厚,可延长其水解时间,而且每次均需更换洗涤剂) ↓ 蒸馏水冲洗 3 次(使水解停止) ↓ Schiff 试剂中染色 40min ↓ 用亚硫酸水洗 3~5 次(以洗去多余的非特异性色素及扩散的染料) ↓ 流水冲洗 5 min ↓ 蒸馏水洗片刻 ↓ 1%亮绿复染数秒钟 (注意: 复染时间切忌过长,以免染色过深,影响对 DNA 的观察)
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