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直槽的缓冲液槽较小,故通过缓冲液的电流量通常较大,需要使用 1×TBE以提供足够的缓冲容量。 ②Tris-甘氨酸缓冲液用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。 2XSDS凝胶加样缓冲液(分离蛋白): 100mmol/L Tris.HC1(6.8) 200mmo1/L二硫苏糖醇(DTT) 4%SDS(电泳级) 0.2%溴酚蓝 20%甘油 不含DTT的2XSDS凝胶加样缓冲液可保存于室温,应在临用前取 1mol/L贮存液现加于上述缓冲液中。 2.凝胶加样缓冲液 缓冲液类型 6×缓冲液 贮存温度 0.25%溴酚蓝 1 0.25%二甲苯青FF 4℃ 40%(W/N)蔗糖水溶液 0.25溴酚蓝 0.25%二甲苯青FF 室温 15%聚蔗糖(Fico11400) 0.25%溴酚蓝 Ⅲ 0.25%二甲苯青F℉ 4℃ 30%甘油水溶液 0.25%溴酚蓝 40%(W/N)蔗糖水溶液 4℃ 使用以上凝胶加样缓冲液的目的有三:增大样品密度:确保DA均匀进 入样品孔内:使样品呈现颜色,从而使加样操作更为便利。溴酚蓝在琼脂糖 中移动的速率约为二甲苯青F℉的2.2倍,而与琼脂糖浓度无关。直槽的缓冲液槽较小, 故通过缓冲液的电流量通常较大,需要使用 1×TBE 以提供足够的缓冲容量。 ② Tris-甘氨酸缓冲液用 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳。 2×SDS 凝胶加样缓冲液(分离蛋白): 100mmol/L Tris·HCl(6.8) 200mmol/L 二硫苏糖醇(DTT) 4%SDS(电泳级) 0.2%溴酚蓝 20%甘油 不含 DTT 的 2×SDS 凝胶加样缓冲液可保存于室温,应在临用前取 1mol/L 贮存液现加于上述缓冲液中。 2.凝胶加样缓冲液 缓冲液类型 6×缓冲液 贮存温度 Ⅰ 0.25%溴酚蓝 4℃ 0.25%二甲苯青 FF 40%(W/V)蔗糖水溶液 Ⅱ 0.25 溴酚蓝 室温 0.25%二甲苯青 FF 15%聚蔗糖(Ficoll400) Ⅲ 0.25%溴酚蓝 4℃ 0.25%二甲苯青 FF 30%甘油水溶液 Ⅳ 0.25%溴酚蓝 4℃ 40%(W/V)蔗糖水溶液 使用以上凝胶加样缓冲液的目的有三:增大样品密度;确保 DNA 均匀进 入样品孔内;使样品呈现颜色,从而使加样操作更为便利。溴酚蓝在琼脂糖 中移动的速率约为二甲苯青 FF 的 2.2 倍,而与琼脂糖浓度无关
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