4.启动子下游和终止子上游.因为只有插入在启动子和终止子之间，目的基因才可以正常 表达 第三步(1)植物细胞：①花粉管通道法：②农杆菌转化法 (2)动物细胞：显微注射法将目的基因导入受精卵中。 (3)原核生物：Ca+处理法（感受态细胞法）。 第四步：1.目的基因是否插入染色体的DNA。 2.(1)分子水平检测： 测转基 生物的染色体DNA上是否插入了目的基因(PCR法等) ②检测目的基因是否转录出了mRNA(PCR法等). ③检测目的基因是否翻译成蛋白质（抗原一抗体杂交法）。 (2)个体生物学水平鉴定： 抗虫鉴定、抗病鉴定、耐盐鉴定、耐低温鉴定等。 课堂探 高温解旋酶外内DNA聚合酶DNA解旋酶DNA聚合酶较高温和 脱氧核苷酸链4种脱氧核苷酸DNA聚合酶3 二、(I)启动子是位于基因首端的一段特殊序列，它是RNA聚合南识别、结合的部位：终 止子是位于基因尾端的一段特殊序列，作用是使转录过程停止。 2)起始窑码子和终止密码子均位于mRNA上，分别控制翻译过程的启动和终止。 、1指目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内 维持稳定和表达的过程。 2.能够在自然情况下侵染双子叶植物和裸子植物，将T质粒上的TDNA转移到被侵染的 细胞，并将其整合到该细胞的染色体DNA上。 3.可转移的DNA。将目的基因插入T质粒的T-DNA中，通过农杆菌的转化作用，可以将 目的基因导入植物细胞。 核心素养专练 1.A 2.B【解析】PCR是体外复制DNA的技术，A正确：PCR过程中需要一种模板DNA、 两种引物分子、大量脱氧核苷酸，还需要缓冲液、Tag DNA聚合酶等，B错误：Tag DNA聚合 确具有耐高温的特点C正确：CR利用的是DNA的共变性原理商过调节温度来控制DNA 双链的解聚与结合D正确。 4B【解析】由于受体细胞有植物、动物和微生物之分，以及目的基因导入受体细胞的 方式不同，所以基因表达载体的构建也会有所差别，不可能千篇一律。 5B【解析】图示中克隆的重金属转运蛋白HMA3)基因与外源高效启动子连接岸入 柄树基因组中，若要检测获得的转基国杨树苗中是否含有导入的H43基因和高效启动子，需 要检测是否合有高效启动子序列和HM43基因序列，应选择的引物组合是①+②，即B正确，A C、D错误。 6.C【解析】甲为运载体，可能是质粒，也可能是噬菌体或动植物病毒，A错误：①为筛选 含有目的基因的受体细胞的过程，由于标记基因不一定是抗性基因，因此该过程不一定是用含 有抗生素的培养基来筛选会目的基因的受体细脱.也可能是通过荧光标记来筛选舍目的基因 的受体细胞，B错误：基国工程的受体细跑可以是生 细胞，D错误。 7B【解析】抗卡那霉素基因是标记基因，目的是便于鉴定和纬进合有目的基因的细 胞，A正确：构建过程中需要将目的基因完整切割下来，此时要用到限制酶PI、EcoR I,B4.启动子下游和终止子上游。因为只有插入在启动子和终止子之间,目的基因才可以正常 表达。 第三步:(1)植物细胞:①花粉管通道法;②农杆菌转化法。 (2)动物细胞:显微注射法将目的基因导入受精卵中。 (3)原核生物:Ca2+处理法(感受态细胞法)。 第四步:1.目的基因是否插入染色体的 DNA。 2.(1)分子水平检测: ①检测转基因生物的染色体 DNA 上是否插入了目的基因(PCR 法等)。 ②检测目的基因是否转录出了 mRNA(PCR 法等)。 ③检测目的基因是否翻译成蛋白质(抗原—抗体杂交法)。 (2)个体生物学水平鉴定: 抗虫鉴定、抗病鉴定、耐盐鉴定、耐低温鉴定等。 课堂探究 一、高温 解旋酶 外 内 DNA 聚合酶 DNA 解旋酶 DNA 聚合酶 较高 温和 脱氧核苷酸链 4 种脱氧核苷酸 DNA 聚合酶 3' 二、(1)启动子是位于基因首端的一段特殊序列,它是 RNA 聚合酶识别、结合的部位;终 止子是位于基因尾端的一段特殊序列,作用是使转录过程停止。 (2)起始密码子和终止密码子均位于 mRNA 上,分别控制翻译过程的启动和终止。 三、1.指目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。 2.能够在自然情况下侵染双子叶植物和裸子植物,将Ti质粒上的T-DNA转移到被侵染的 细胞,并将其整合到该细胞的染色体 DNA 上。 3.可转移的 DNA。将目的基因插入 Ti 质粒的 T-DNA 中,通过农杆菌的转化作用,可以将 目的基因导入植物细胞。 核心素养专练 1.A 2.B 【解析】PCR 是体外复制 DNA 的技术,A 正确;PCR 过程中需要一种模板 DNA、 两种引物分子、大量脱氧核苷酸,还需要缓冲液、Taq DNA 聚合酶等,B 错误;Taq DNA 聚合 酶具有耐高温的特点,C 正确;PCR 利用的是 DNA 的热变性原理,通过调节温度来控制 DNA 双链的解聚与结合,D 正确。 3.D 4.B 【解析】由于受体细胞有植物、动物和微生物之分,以及目的基因导入受体细胞的 方式不同,所以基因表达载体的构建也会有所差别,不可能千篇一律。 5.B 【解析】图示中克隆的重金属转运蛋白(HMA3)基因与外源高效启动子连接,导入 杨树基因组中,若要检测获得的转基因杨树苗中是否含有导入的 HMA3 基因和高效启动子,需 要检测是否含有高效启动子序列和HMA3基因序列,应选择的引物组合是①+②,即B正确,A、 C、D 错误。 6.C 【解析】甲为运载体,可能是质粒,也可能是噬菌体或动植物病毒,A 错误;①为筛选 含有目的基因的受体细胞的过程,由于标记基因不一定是抗性基因,因此该过程不一定是用含 有抗生素的培养基来筛选含目的基因的受体细胞,也可能是通过荧光标记来筛选含目的基因 的受体细胞,B 错误;基因工程的受体细胞可以是微生物细胞、植物细胞或动物细胞,因此丙可 以是单细胞、器官、植物或动物等,C 正确;若要使丙表达人的蛋白质,则乙应该是其他生物的 细胞,D 错误。 7.B 【解析】抗卡那霉素基因是标记基因,目的是便于鉴定和筛选含有目的基因的细 胞,A 正确;构建过程中需要将目的基因完整切割下来,此时要用到限制酶 PstⅠ、EcoR Ⅰ,B