设计引物 提取糯玉米DNA自 PCR扩增 纯化回收PCR产物 MD18/19 T Vector纯化后的PCR产物补A E coli. DH5a感受态细胞 连接 化 挑选阳性克隆 阳性克隆的筛选与鉴定 DNA提取 与测序技 测序 术路线 序列分析DNA提取 与测序技 术路线