琼脂是由海藻中提取得一种多糖类物质，对病原性细菌无营养作用，但在水中加温可融化， 冷却后可凝固。在液体培养基中加入琼脂1.5一2%即可固定培养基，如加入0,3一 0.5%则成半固体培养基。 将称好的琼脂加到普容肉汤中，加热煮沸，待琼脂完全融化后，将H调至7.4~7.6。 琼脂融化过程中需不断搅拌，并控制火力，不使培养基溢出或烧焦，并注意补充蒸发掉的水 份。 加热溶解好的培养基可用滤纸进行过滤，固体培养基要用4层纱布趁热过滤（切勿使培养 基凝固在纱布上)，之后按实验要求，将配制好的培养基分装入试管或三角瓶中，包扎好待 灭菌，将培养基置于高压蒸汽锅内，121℃灭菌15~30min,趁热将试管口一端搁在 玻棒上，使之有一定坡度，凝固后即成普通琼脂斜面，也可直立，凝固后即成高层琼脂。 盐水瓶中的普通琼脂己手掌感触，若将瓶紧握手中觉得烫手，但仍能握持者，此即为倾倒平 皿的合适温度(50~60℃)，每只灭茵培养皿倒入约15~20m1,将皿盖盖上，并 将培养皿于桌面上轻轻回转，使培养基平铺于皿底，即成普通琼脂平板。 培养基中的某种成分，如血清、糖类、尿素、氨基酸等在高温下易于分解、变性，故应过滤 除菌，再按规定的量加入培养基中。 （3)鲜血琼脂培养基 将灭菌的普通琼脂培养基冷却至0℃左右，加入无菌的绵羊或家兔脱纤鲜血达5%（即 每100l普通琼脂加入鲜血5~6ml),混合后，分装灭茵试管立即摆成斜面或倾注 于平皿内（如果琼脂温度过高，鲜血加入后则成紫褐色，温度过低，则鲜血加入琼脂易凝不 易混合。注意，混合时切勿产生气泡)待凝固后，置37℃培养24h,无菌检验合格方可 应用。 无南血液是用无菌操作方法采自健康动物，通常是绵羊或家兔的血液，加到盛有5%灭茵 枸格酸钠或3%灭菌肝素的100ml三角瓶内，或加到盛有玻璃小珠的灭菌三角瓶内摇动 脱纤后置冰箱中待用。 [细菌培养]琼脂是由海藻中提取得一种多糖类物质，对病原性细菌无营养作用，但在水中加温可融化， 冷却后可凝固。在液体培养基中加入琼脂 1 . 5 ～ 2 ％即可固定培养基，如加入 0 . 3 ～ 0 . 5 ％则成半固体培养基。 将称好的琼脂加到普容肉汤中，加热煮沸，待琼脂完全融化后，将 pH 调至 7 . 4 ～ 7 . 6 。 琼脂融化过程中需不断搅拌，并控制火力，不使培养基溢出或烧焦，并注意补充蒸发掉的水 份。 加热溶解好的培养基可用滤纸进行过滤，固体培养基要用 4 层纱布趁热过滤（切勿使培养 基凝固在纱布上），之后按实验要求，将配制好的培养基分装入试管或三角瓶中，包扎好待 灭菌，将培养基置于高压蒸汽锅内， 121 ℃ 灭菌 15 ～ 30min ，趁热将试管口一端搁在 玻棒上，使之有一定坡度，凝固后即成普通琼脂斜面，也可直立，凝固后即成高层琼脂。 盐水瓶中的普通琼脂已手掌感触，若将瓶紧握手中觉得烫手，但仍能握持者，此即为倾倒平 皿的合适温度（ 50 ～ 60 ℃ ），每只灭菌培养皿倒入约 15 ～ 20ml ，将皿盖盖上，并 将培养皿于桌面上轻轻回转，使培养基平铺于皿底，即成普通琼脂平板。 培养基中的某种成分，如血清、糖类、尿素、氨基酸等在高温下易于分解、变性，故应过滤 除菌，再按规定的量加入培养基中。 （ 3 ）鲜血琼脂培养基 将灭菌的普通琼脂培养基冷却至 50 ℃ 左右，加入无菌的绵羊或家兔脱纤鲜血达 5 ％（即 每 100 ml 普通琼脂加入鲜血 5 ～ 6 ml ），混合后，分装灭菌试管立即摆成斜面或倾注 于平皿内（如果琼脂温度过高，鲜血加入后则成紫褐色，温度过低，则鲜血加入琼脂易凝不 易混合。注意，混合时切勿产生气泡）待凝固后，置 37℃ 培养 24h ，无菌检验合格方可 应用。 无菌血液是用无菌操作方法采自健康动物，通常是绵羊或家兔的血液，加到盛有 5 ％灭菌 枸橼酸钠或 3 ％灭菌肝素的 100 ml 三角瓶内，或加到盛有玻璃小珠的灭菌三角瓶内摇动 脱纤后置冰箱中待用。 [ 细菌培养 ]