由于悬浮培养具有三个基本优点：①增加培养细胞与培养液的接触面，改善营养供应； ②可带走培养物产生的有害代谢产物，避免有害代谢产物局部浓度过高等问题；③保证氧的 充分供给。因此，悬浮培养细胞的生长条件比固体培养有很大的改善。 悬浮培养时细胞的生长曲线如图 14-8 所示，细胞数量随时间变化曲线呈现 S 形。在细 胞接种到培养基中最初的时间内细胞很少分裂，经历一个延滞期后进入对数生长期和细胞迅 速增殖的直线生长期，接着是细胞增殖减慢的减慢期和停止生长的静止期。整个周期经历时 间的长短因植物种类和起始培养细胞密度的不同而不同。在植物细胞培养过程中，一般在静 止期或静止期前后进行继代培养，具体时间可根据静止期细胞活力的变化而定。 图 14-8 悬浮培养时细胞的生长曲线 6、细胞团和愈伤组织的再形成和植株的再生 悬浮培养的单个细胞在 3～5d 内即可见细胞分裂，经过一星期左右的培养，单个细胞和 小的聚集体不断分裂而形成肉眼可见的小细胞团。大约培养两周后，将细胞分裂再形成的小 愈伤组织团块及时转移到分化培养基上，连续光照，三星期后可分化成试管苗。 (二)植物细胞或原生质体的固定化培养 经过多年的研究发现，与悬浮培养相比，固定化培养具有很多优点：（1）提高了次生 物质的合成、积累；（2）能长时间保持细胞活力；（3）可以反复使用；（4）抗剪切能力 强；（5）耐受有毒前体的浓度高；（6）遗传性状较稳定；（7）后处理难度小；（8）更好 的光合作用；（9）促进或改变产物的释放。 1979年，Brodelius首次将高等植物细胞固定化培养以获得目的次级代谢产物，此后，植 物细胞的固定化培养得到不断的发展，逐步显示其优势。不完全统计，约有50多种植物细胞 已成功地进行了固定化培养. 植物细胞的固定化常采用海藻酸盐、卡拉胶、琼脂糖和琼脂材料，均采用包埋法，其他 方式的固定化植物细胞很少使用。 原生质体比完整的细胞更脆弱，因此，只能采用最温和的固定化方法进行固定化，通 常也是用海藻酸盐、卡拉胶和琼脂糖进行固定化。 五、影响植物细胞培养的因素 植物细胞生长和产物合成动力学也可分为三种类型：①生长偶联型，产物的合成与细胞 的生长呈正比；②中间型，产物仅在细胞生长一段时间后才能合成，但细胞生长停止时，产 物合成也停止；③非生长偶联型，产物只有在细胞生长停止时才能合成。事实上，由于细胞由于悬浮培养具有三个基本优点：①增加培养细胞与培养液的接触面，改善营养供应； ②可带走培养物产生的有害代谢产物，避免有害代谢产物局部浓度过高等问题；③保证氧的 充分供给。因此，悬浮培养细胞的生长条件比固体培养有很大的改善。 悬浮培养时细胞的生长曲线如图 14-8 所示，细胞数量随时间变化曲线呈现 S 形。在细 胞接种到培养基中最初的时间内细胞很少分裂，经历一个延滞期后进入对数生长期和细胞迅 速增殖的直线生长期，接着是细胞增殖减慢的减慢期和停止生长的静止期。整个周期经历时 间的长短因植物种类和起始培养细胞密度的不同而不同。在植物细胞培养过程中，一般在静 止期或静止期前后进行继代培养，具体时间可根据静止期细胞活力的变化而定。 图 14-8 悬浮培养时细胞的生长曲线 6、细胞团和愈伤组织的再形成和植株的再生 悬浮培养的单个细胞在 3～5d 内即可见细胞分裂，经过一星期左右的培养，单个细胞和 小的聚集体不断分裂而形成肉眼可见的小细胞团。大约培养两周后，将细胞分裂再形成的小 愈伤组织团块及时转移到分化培养基上，连续光照，三星期后可分化成试管苗。 (二)植物细胞或原生质体的固定化培养 经过多年的研究发现，与悬浮培养相比，固定化培养具有很多优点：（1）提高了次生 物质的合成、积累；（2）能长时间保持细胞活力；（3）可以反复使用；（4）抗剪切能力 强；（5）耐受有毒前体的浓度高；（6）遗传性状较稳定；（7）后处理难度小；（8）更好 的光合作用；（9）促进或改变产物的释放。 1979年，Brodelius首次将高等植物细胞固定化培养以获得目的次级代谢产物，此后，植 物细胞的固定化培养得到不断的发展，逐步显示其优势。不完全统计，约有50多种植物细胞 已成功地进行了固定化培养. 植物细胞的固定化常采用海藻酸盐、卡拉胶、琼脂糖和琼脂材料，均采用包埋法，其他 方式的固定化植物细胞很少使用。 原生质体比完整的细胞更脆弱，因此，只能采用最温和的固定化方法进行固定化，通 常也是用海藻酸盐、卡拉胶和琼脂糖进行固定化。 五、影响植物细胞培养的因素 植物细胞生长和产物合成动力学也可分为三种类型：①生长偶联型，产物的合成与细胞 的生长呈正比；②中间型，产物仅在细胞生长一段时间后才能合成，但细胞生长停止时，产 物合成也停止；③非生长偶联型，产物只有在细胞生长停止时才能合成。事实上，由于细胞